Clonagem do gene da proteína dissulfeto isomerase (2005)
- Authors:
- USP affiliated authors: CARVALHO, MARIA HELENA CATELLI DE - ICB ; LOPES, LUCIA ROSSETTI - ICB ; CURI, RUI - ICB
- Unidade: ICB
- Subjects: FARMACOLOGIA; FISIOLOGIA
- Language: Português
- Abstract: Objetivo: Clonagem e inserção do gene da PDI num vetor de expressão que será posteriormente utilizado para a investigação dos mecanismos moleculares e funcionais da interação PDI-NADPH oxidase. Materiais e Métodos: Células de músculo liso vascular foram mantidas em cultura e seu RNA extraído com Trizol. Esse RNA foi utilizado para a síntese de cDNA por técnica de RT-PCR. O cDNA serviu como template para a amplificação do gene da PDI por PCR a partir de primers do gene da PDI para permitir a expressão da proteína na orientação senso(hiper) e anti-senso(hipo). A análise dos produtos de PCR foi realizada em gel de agarose 1,5%. Os produtos de PCR foram purificados e inseridos no vetor pcDNA TOPO. Bactérias foram então transformadas por eletroporação com o vetor contendo PDI. Resultados: O aparecimento de uma banda de 1.7kb, no gel de agarose pós-PCR, mostrou que o produto desta reação (gene da PDI) foi amplificado. Verificou-se um aumento do tamanho do vetor em 1,7kb, sugerindo a inserção da PDI no vetor. A eficácia da transformação foi comprovada pela resistência observada em meio com ampicilina. Conclusão: O gene da PDI foi clonado com sucesso no vetor pcDNA TOPO
- Imprenta:
- Publisher: Universidade de São Paulo
- Publisher place: Ribeirão Preto
- Date published: 2005
- Source:
- Título do periódico: Resumos
- Conference titles: Simpósio Internacional de Iniciação Científica da Universidade de São Paulo, SIICUSP
-
ABNT
NASCIBEN, Vitor Daniel et al. Clonagem do gene da proteína dissulfeto isomerase. 2005, Anais.. Ribeirão Preto: Universidade de São Paulo, 2005. . Acesso em: 03 maio 2024. -
APA
Nasciben, V. D., Lima, T. M. de, Lopes, L. R., Curi, R., Janiszewski, M., & Carvalho, M. H. C. de. (2005). Clonagem do gene da proteína dissulfeto isomerase. In Resumos. Ribeirão Preto: Universidade de São Paulo. -
NLM
Nasciben VD, Lima TM de, Lopes LR, Curi R, Janiszewski M, Carvalho MHC de. Clonagem do gene da proteína dissulfeto isomerase. Resumos. 2005 ;[citado 2024 maio 03 ] -
Vancouver
Nasciben VD, Lima TM de, Lopes LR, Curi R, Janiszewski M, Carvalho MHC de. Clonagem do gene da proteína dissulfeto isomerase. Resumos. 2005 ;[citado 2024 maio 03 ] - Protein disulfide isomerase regulates reactive oxygen species generation and vascular reactivity to angiotensin II in rat aorta
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