Transcrição reversa na determinação da expressão do mRNA para a enzima conversora de angiotensina testicular em animais tratados com zinco (2005)
- Authors:
- USP affiliated authors: HIRATA, ROSARIO DOMINGUEZ CRESPO - FCF ; HIRATA, MARIO HIROYUKI - FCF ; COZZOLINO, SILVIA M. F. - FCF
- Unidade: FCF
- DOI: 10.1590/s1415-52732005000600004
- Subjects: NUTRIÇÃO EXPERIMENTAL; ZINCO (EFEITOS); RNA MENSAGEIRO; ANGIOTENSINAS
- Language: Português
- Abstract: O objetivo deste trabalho foi otimizar as condições reacionais capazes de ocasionar variabilidade e de introduzir erros sistemáticos na reação em cadeia pela polimerase aplicada à análise da expressão gênica da isoforma testicular da enzima conversora de angiotensina. MÉTODOS: Avaliaram-se a concentração de cDNA, a concentração dos iniciadores, a temperatura de hibridização e o número de ciclos de desnaturação, hibridização e extensão. Para tanto, extraiu-se o RNA total por meio da reação com fenol-clorofórmio e isotiocianato de guanidina de amostras de testículos de ratos Wistar alimentados com uma ração contendo zinco. Em seguida, gerou-se o cDNA por transcrição reversa. Utilizando-se iniciadores específicos, amplificaram-se o gene de interesse (isoforma testicular da enzima conversora de angiotensina) e o gene controle Gliceraldeído-3-Fosfato-Desidrogenase. As amostras foram então aplicadas em gel de agarose e submetidas à eletroforese, coradas em brometo de etídio e visualizadas sob luz ultravioleta. RESULTADOS: Demonstrou-se que a melhor condição reacional para a reação em cadeia pela polimerase da isoforma testicular da enzima conversora de angiotensina e do Gliceraldeído-3-Fosfato-Desidrogenase foi: (1) concentração inicial de cDNA de 2µg, (2) concentração de iniciadores de 200nM, (3) temperatura de hibridização entre 57,5ºC e 60,1ºC e (4) 33 ciclos. CONCLUSÃO: Com essa otimização pôde-se minimizar as interferências sobre a técnica, contribuindo-separa a obtenção de dados comparativos a respeito da expressão gênica da enzima conversora de angiotensina testicular
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- Título do periódico: Revista de Nutrição
- ISSN: 1415-5273
- Volume/Número/Paginação/Ano: v. 18, n. 6, p. 733-742, 2005
- Este periódico é de acesso aberto
- Este artigo é de acesso aberto
- URL de acesso aberto
- Cor do Acesso Aberto: gold
- Licença: cc-by-nc
-
ABNT
HENRIQUES, Gilberto Simeone et al. Transcrição reversa na determinação da expressão do mRNA para a enzima conversora de angiotensina testicular em animais tratados com zinco. Revista de Nutrição, v. 18, n. 6, p. 733-742, 2005Tradução . . Disponível em: https://doi.org/10.1590/s1415-52732005000600004. Acesso em: 18 abr. 2024. -
APA
Henriques, G. S., Silva, A. G. H. da, Hirata, R. D. C., Hirata, M. H., & Cozzolino, S. M. F. (2005). Transcrição reversa na determinação da expressão do mRNA para a enzima conversora de angiotensina testicular em animais tratados com zinco. Revista de Nutrição, 18( 6), 733-742. doi:10.1590/s1415-52732005000600004 -
NLM
Henriques GS, Silva AGH da, Hirata RDC, Hirata MH, Cozzolino SMF. Transcrição reversa na determinação da expressão do mRNA para a enzima conversora de angiotensina testicular em animais tratados com zinco [Internet]. Revista de Nutrição. 2005 ; 18( 6): 733-742.[citado 2024 abr. 18 ] Available from: https://doi.org/10.1590/s1415-52732005000600004 -
Vancouver
Henriques GS, Silva AGH da, Hirata RDC, Hirata MH, Cozzolino SMF. Transcrição reversa na determinação da expressão do mRNA para a enzima conversora de angiotensina testicular em animais tratados com zinco [Internet]. Revista de Nutrição. 2005 ; 18( 6): 733-742.[citado 2024 abr. 18 ] Available from: https://doi.org/10.1590/s1415-52732005000600004 - Padrões de expressão do mRNA e da atividade da enzima conversora de angiotensina em ratos deficientes em zinco, suplementados co o metal em diferentes etapas do desenvolvimento
- Experimental zinc depletion in Wistar rats during the breast-feeding period from the control of zinc quantities in an AIN-93 semi-purified diet
- Determinação da atividade e da expressão do mRNA para a isoforma testicular da enzima conversora de angiotensina como parâmetro da biodisponibilidade de zinco
- Padrões de expressão do mRNA e da atividade da enzima conversora de angiotensina em ratos deficientes em zinco, suplementados com o metal em diferentes etapas do desenvolvimento
- Optimization of the RT-PCR technique for the determination of the mRNA expression to testis angiotensis-converting enzyme in zinc treated rats
- Aspectos recentes da absorção e biodisponibilidade do zinco e suas correlações com a fisiologia da isoforma testicular da enzima conversora de angiotensina
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Informações sobre o DOI: 10.1590/s1415-52732005000600004 (Fonte: oaDOI API)
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