Estudo de RNAs regulatórios em Leishmania por genética reversa (2006)
- Authors:
- Autor USP: NOGUEIRA, KARINA DA COSTA - FMRP
- Unidade: FMRP
- Sigla do Departamento: RBP
- Subjects: LEISHMANIA; GENOMAS (ANÁLISE); BIOLOGIA MOLECULAR
- Language: Português
- Abstract: O seqüenciamento do genoma de Leishmania levou à identificação de genes tendo como base a predição de proteínas que esses genes codificam. Entretanto, seqüências que não possuem uma fase aberta de leitura mas que codificam RNAs como produto final foram ignoradas durante o processo de anotação. Há um grande número de ncRNAS descrito em vários organismos, são transcritos que não codificam proteínas, mas que funcionam como RNAs, representando uma classe de moléculas com função estrutural ou catalítica. Nós investigamos três potenciais moléculas de ncRNAs de Leishmania, ODD1, ODD2 e ODD3; seus transcritos têm estrutura secundária que formam grampos conservados similares aos descritos para os microRNAs. Partindo de fragmentos isolados de cosmídeos recombinantes, nós construímos clones adequados à expressão de cada um dos genes ODD isoladamente em Leishmania, os vetores plasmidiais empregados foram px63NEO ou pGEMT_neoKO. Os recombinantes foram analisados e transfectados em Leishmania para se obter transfectantes que superexpressassem os genes ODD a partir da molécula circular; os transfectantes foram cultivados sob pressão por droga de seleção (G418) para manter as cópias do epissomo e a expressão de seus genes. Esses novos transfectantes foram investigados quanto a mudanças fenotípicas e modificações dos níveis de potenciais mRNAs alvo (identificados por RT-PCR por Márcia Graminha). Mudanças no fenótipo não foram observadas para os genes ODD1 e ODD2. Por outro lado, osuperexpressor de ODD3 apresenta-se sobre efeito citostático claro em cultura axênica, sua morfologia mostra-se alterada sob microscopia de varredura e há modificações drásticas de sua ploidia. Nossos resultados preliminares indicam haver modificação do nível de um dos mRNAs identificados como alvo de ODD3
- Imprenta:
- Publisher place: Ribeirão Preto
- Date published: 2006
- Data da defesa: 26.01.2006
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ABNT
NOGUEIRA, Karina da Costa. Estudo de RNAs regulatórios em Leishmania por genética reversa. 2006. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2006. . Acesso em: 19 abr. 2024. -
APA
Nogueira, K. da C. (2006). Estudo de RNAs regulatórios em Leishmania por genética reversa (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. -
NLM
Nogueira K da C. Estudo de RNAs regulatórios em Leishmania por genética reversa. 2006 ;[citado 2024 abr. 19 ] -
Vancouver
Nogueira K da C. Estudo de RNAs regulatórios em Leishmania por genética reversa. 2006 ;[citado 2024 abr. 19 ]
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