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Caracterização cinética da (‘Na POT. +’,’K POT. +’)-ATPase da fração tecido branquial do ermitão intertidal Clibanarius vittatus (Crustacea, Decapoda) (2007)

  • Authors:
  • Autor USP: GONÇALVES, RUBIA REGINA - FFCLRP
  • Unidade: FFCLRP
  • Sigla do Departamento: 593
  • Subjects: DECAPODA; CRUSTÁCEOS; ENZIMOLOGIA; MACROMOLÉCULA (QUÍMICA)
  • Language: Português
  • Abstract: A (‘Na POT. +’,’K POT. +’)-ATPase presente no tecido branquial dos crustáceos osmorreguladores é um para o sistema de regulação iônica e osmótica e de excreção ativa de ‘N’H IND. 4’ POT. +’. Dessa forma, a caracterização cinética da (‘Na POT. +’,’K POT. +’)-ATPase branquial de vittatus (C. vittatus), pode fornecer dados importantes para a compreensão dos bioquímicos desses processos. Nesse sentido, foram realizados ensaios com a fração microsomal obtida do tecido branquial de C. vittatus. Os dados revelaram a presença de um único pico com atividade ATPase, com uma subunidade ‘alfa’ de peso molecular de 105 kDa. Os dados obtidos a partir do substrato ATP a presença de dois sítios, um de alta com interação sítio-sítio (‘n IND. H’=1,9; ‘K IND. 0,5’= 63,8 ± 2,9 nM e V= 19,1 ± 0,8 U/mg) e outro de baixa afinidade obedecendo a cinética Michaeliana (‘n IND. H’=1,0; ‘K IND. M’= 44,1 ‘n IND. H’ 2,6 ‘mü’M e ‘V IND. M’= 123,5 ± 6,1 U/mg). Além disso, uma do tipo sítio-sítio (‘n IND. H’= 1,8) foi observada para estimulação dos íons magnésio (V=132,0 ± 5,3 U/mg e ‘K IND. 0,5’= 0,36 ± 0,02 nM). Por outro lado, as interações dos íons (‘K IND. 0,5’= 7,4 ± 0,4 mM), potássio (‘K IND. 0,5’= 1,51 ± 0,05 mM) e amônio (‘K IND. 0,5’= 4,5 ± 0,2 mM) obedeceram uma cinética Michaeliana. Os dados obtidos mostraram que em saturantes de íons potássio, a atividade enzimática aumenta na presença de íons de maneira concentração-dependente (V= 290,8 ± 14,4 U/mg e ‘K IND. M’= 2,9 ± 0,1 mM). Apresença da ouabaína no meio reacional induziu 66% de inibição (K1= 117,3 ± 3,5 indicando a presença residual de outras ATPases. A atividade ‘K POT. +’-fosfatase, medida utilização do substrato sintético PNFF (V= 47,4 ± 1,9 U/mg e ‘K IND. M’= 1,0 ± 0,04 mM), indicou um único sítio de hidrólise com característica Michaeliana (‘N IND. H’= 1,1). Entretanto, para os íons ‘Mg POT. 2+’ (‘N IND. H’= 2,6 e ‘K IND. 0,5’= 0,6 ± 0,1 mM), ‘K POT. +’ (‘N IND. H’= 1.4 ) e ‘K IND. 0,5’= 3,7 ± 0,1 mM) e ‘N’H IND. 4’ POT. +’ (‘N IND. H’= 1,9 e ‘K IND. 0,5’= 19,3 ± 0,7 mM) foi observada uma interação do tipo sítio-sítio. Em conjunto, esses dados fornecem parâmetros cinéticos importantes da (‘Na POT. +’,’K POT. +’)-ATPase branquial de C. vittatus, reforçando a importância da estiniulação sinérgicapelos íons ‘K POT. +’ e ‘N’H IND. 4’ POT. +’, a qual parece contribuir com o eficiente mecanismo adaptativo desencadeado em resposta à exposição a altas concentrações externas de amônia. É importante ressaltar que o presente trabalho é o primeiro estudo que realizou a caracterização cinética da enzima (‘Na POT. +’,’K POT. +’)-ATPase no ermitão C. vittatus, o qual está inserido em um microambiente constituído pela concha. Finalmente, este trabalho agrega informações relevantes relacionadas ao grupo dos Decapoda, fornecendo dados essenciais sobre o papel da (‘Na POT. +’,’K POT. +’)-ATPase nos processos metabólicos e de osmorregulação nos crustáceos
  • Imprenta:
  • Data da defesa: 23.03.2007
  • Acesso à fonte
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    • ABNT

      SIVIERI, Rubia Regina Gonçalves. Caracterização cinética da (‘Na POT. +’,’K POT. +’)-ATPase da fração tecido branquial do ermitão intertidal Clibanarius vittatus (Crustacea, Decapoda). 2007. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2007. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/59/59138/tde-12052007-095301/. Acesso em: 23 abr. 2024.
    • APA

      Sivieri, R. R. G. (2007). Caracterização cinética da (‘Na POT. +’,’K POT. +’)-ATPase da fração tecido branquial do ermitão intertidal Clibanarius vittatus (Crustacea, Decapoda) (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/59/59138/tde-12052007-095301/
    • NLM

      Sivieri RRG. Caracterização cinética da (‘Na POT. +’,’K POT. +’)-ATPase da fração tecido branquial do ermitão intertidal Clibanarius vittatus (Crustacea, Decapoda) [Internet]. 2007 ;[citado 2024 abr. 23 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/59/59138/tde-12052007-095301/
    • Vancouver

      Sivieri RRG. Caracterização cinética da (‘Na POT. +’,’K POT. +’)-ATPase da fração tecido branquial do ermitão intertidal Clibanarius vittatus (Crustacea, Decapoda) [Internet]. 2007 ;[citado 2024 abr. 23 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/59/59138/tde-12052007-095301/


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