Desenvolvimento de linhagens sensoras para análise de ciclo celular In vivo e em tempo real (2007)
- Authors:
- Autor USP: STRAUSS, EUGENIA COSTANZI - ICB
- Unidade: ICB
- Assunto: HISTOLOGIA
- Language: Português
- Abstract: Objetivo: Análise do ciclo celular tem sido usada para descobrir alvos terapêuticos e desenvolver novos medicamentos, incluindo os utilizados em oncologia, cardiologia, reumatologia, neurologia, entre outros. Imagem dinâmica in vivo e em tempo real é fundamental para avaliar o curso normal da divisão e acompanhar os efeitos de pertubações naturais ou experimentais. Um modelo de proliferação celular útil deve incorporar uma metodologia não invasiva que permita acompanhar o processo dinâmico de divisão de cada célula individualmente ao longo do tempo. Nosso objetivo é gerar linhagens sensoras para análise em tempo real do ciclo celular e a estratégia escolhida foi a de atribuir duas assinaturas ópticas de diferentes espectros as células alvo, conferindo luminosidade distinta ao núcleo e ao citoplasma. A expressão de proteínas bioluminescentes (light-emitting proteins) GFP (green fluorescent protein) e respectivas variantes espectrais amarela (YFP) e vermelha (DsRed), será mediada por vetores retrovirais. Métodos e Resultados: Iniciamos com a construção de vetores retrovirais simples pCLeGFPNS, pCLYFPNS e pCLDsRedNS. O passo seguinte foi a construção dos vetores virais para marcação da cromatina nuclear: pCLH2B-eGFPNS e pCLH2B-YFPNS e do vetor viral pLPDsRed-cito para marcação citoplasmática. O fragmento de histona H2B humana (H2B), produzido por PCR, foi incorporado aos vetores quimeras. As primeiras células sensoras derivadas das linhagens H358 e PC-3 estão sendogeradas via transdução com vírus de marcação nuclear verde ou amarelo (pCLH2B-eGFPNS e pCLH2B-YFPNS) e o vírus citoplasmático vermelho (pLPDsRed-cito). ) Como divisão, senescência, morte e transformação celular são programas de ciclo celular que levam a mudanças na imagem do núcleo e do citoplasma celular, poderemos acompanhar em tempo real todo o dinamismo do ciclo celular nas células utilizando ensaios de FACS ou microscopia de fluorescência. Conclusões: Os vetores e células sensoras produzidos aqui são versáteis ferramentas que funcionam como sensores funcionais de fases e eventos do ciclo celular, incluindo os estágios da mitose, senescência e apoptose. O conhecimento atual da regulação molecular do ciclo celular atingiu um ponto onde podemos mapear os principais circuítos de controle e o desafio da atual biologia celular é integrar os circuítos moleculares em um esquema de imagens descritivas.
- Imprenta:
- Publisher: Federação de Sociedades de Biologia Experimental
- Publisher place: Águas de Lindóia
- Date published: 2007
- Source:
- Título do periódico: Programa e Resumos
- Conference titles: Reunião Anual da Federação de Sociedades de Biologia Experimental - FESBE
-
ABNT
LEGER, F. S. et al. Desenvolvimento de linhagens sensoras para análise de ciclo celular In vivo e em tempo real. 2007, Anais.. Águas de Lindóia: Federação de Sociedades de Biologia Experimental, 2007. . Acesso em: 24 abr. 2024. -
APA
Leger, F. S., Kussuki, M., Strauss, B. E., & Costanzi-Strauss, E. (2007). Desenvolvimento de linhagens sensoras para análise de ciclo celular In vivo e em tempo real. In Programa e Resumos. Águas de Lindóia: Federação de Sociedades de Biologia Experimental. -
NLM
Leger FS, Kussuki M, Strauss BE, Costanzi-Strauss E. Desenvolvimento de linhagens sensoras para análise de ciclo celular In vivo e em tempo real. Programa e Resumos. 2007 ;[citado 2024 abr. 24 ] -
Vancouver
Leger FS, Kussuki M, Strauss BE, Costanzi-Strauss E. Desenvolvimento de linhagens sensoras para análise de ciclo celular In vivo e em tempo real. Programa e Resumos. 2007 ;[citado 2024 abr. 24 ] - Construção de uma nova plataforma de vetores retrovirais contendo EGFP como marcador molecular
- Ires mediando a expressão bicistrônica de dois genes supressores de tumor no sistema de retrovírus pCL
- Retroviral vectors carrying p16INK4a and p21WAF1 tumor suppressor genes and egfp selectable marker
- Construction of an inducible system for retrovirus production
- Validação in vivo do retrovírus policistrônico PCLP161RESP53 em modelo animal de glioblastoma
- Strategic promoter / transgene combintations for cancer gene therapy
- Expression of survivin gene and its splice variants survivin-deltaEx3 and survivin-2B versus p53 expression in astrocytic tumors
- Construction of an inducible system for retrovirus production
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- Perspectivas da terapia gênica
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