Imobilização de proteínas sobre superfícies de polissacarídeos (2008)
- Authors:
- Autor USP: CASTRO, LIZANDRA BELMONTE RODRIGUES DE - IQ
- Unidade: IQ
- Sigla do Departamento: QFL
- Subjects: ADSORÇÃO (PROCESSOS); POLISSACARÍDEOS (CARACTERÍSTICAS); PROTEÍNAS; FILMES FINOS
- Language: Português
- Abstract: Esta tese apresenta o estudo inédito da obtenção e caracterização de filmes finos de xiloglucanas obtidas de duas fontes diferentes, Hymenaea courbaril (HXG) e Tamarindus indica (TXG) sobre lâminas de Si/Si`OIND.2` e lâminas modificadas com grupos amino, assim como a aplicação desses filmes na imobilização da lectina concanavalina A (Con A) por medidas de elipsometria e microscopia de força atômica (AFM). A diferença na estrutura fina de cada XG influenciou na espessura e morfologia de seus filmes finos. Os oligômeros XXXXG presentes apenas na HXG favorecem as interações com à superfície, assim como já observado para interação entre XG-celulose [Lima e Buckeridge, 2001]. A imobilização de Con A foi realizada sobre filmes de carboximetilcelulose (CMC) de HXG, TXG e poli(metacrilato de metila) (PMMA), lâminas de Si/Si´OIND.2´ e partículas poliméricas decoradas com polissacarídeo PMMA/CMC. A adsorção de Con A foi mais pronunciada sobre os filmes de CMC. As camadas de Con A formadas sobre HXG e TXG apresentam potencial utilização no reconhecimento e detecção de carboidratos para desenvolvimento de diagnósticos para algumas doenças, por não comprometerem o sítio de ligação específica da lectina na adsorção. No caso das partículas PMMAlCMC cobertas com uma camada de Con A, a alta estabilidade coloidal do sistema confere às partículas a, possibilidade de explorar a propriedade de aglutinação específica da lectina no reconhecimento de carboidratos. A enzimahexoquinase (HK) foi imobilizada sobre dois diferentes tipos de partículas poliméricas decoradas com polissacarídeo, PMMAlCMC e poliestireno/quitosana (PS/CH). Na primeira, HK perdeu drasticamente sua atividade catalítica, ao contrário do observado quando a mesma enzima foi imobilizada sobre PS/CH, onde a HK manteve aproximadamente ´50 POR CENTO´ de sua atividade enzimática, podendo ser armazenada em temperatura e pressão ambientes por 1 mês ) e ser reutilizada até 3 vezes. A estrutura da camada de hidratação e a composição química de cada um dos polissacarídeos (CMC ou CH) na superfície das partículas são diferentes, provocando diferenças na conformação das moléculas de HK quando imobilizadas sobre cada tipo de partícula. Medidas de forças de adesão utilizando as partículas poliméricas coladas na extremidade de cantilevers de AFM (Colloidal Probe Technique) permitiram medir as espessuras dessas camadas hidratadas de polissacarídeos nas superfícies das partículas PMMA/CMC e PS/CH, da ordem de (´20 MAIS OU MENOS 10´) nm e (´35 MAIS OU MENOS 11´) nm, respectivamente. Essas medidas de força também evidenciaram o potencial dos dois sistemas estudados (PMMA/CMC - Con A e PS/CH - HK) como métodos qualitativos para a detecção dos açúcares manose, glicose e frutose
- Imprenta:
- Data da defesa: 08.07.2008
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ABNT
CASTRO, Lizandra Belmonte Rodrigues de. Imobilização de proteínas sobre superfícies de polissacarídeos. 2008. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2008. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46132/tde-21072008-141047/. Acesso em: 23 abr. 2024. -
APA
Castro, L. B. R. de. (2008). Imobilização de proteínas sobre superfícies de polissacarídeos (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46132/tde-21072008-141047/ -
NLM
Castro LBR de. Imobilização de proteínas sobre superfícies de polissacarídeos [Internet]. 2008 ;[citado 2024 abr. 23 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46132/tde-21072008-141047/ -
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Castro LBR de. Imobilização de proteínas sobre superfícies de polissacarídeos [Internet]. 2008 ;[citado 2024 abr. 23 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46132/tde-21072008-141047/
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