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Identificação de microRNAs na musculatura esquelética de Gallus gallus (2009)

  • Authors:
  • USP affiliated authors: ANDREOTE, ANA PAULA DINI - CENA
  • USP Schools: CENA
  • Subjects: EXPRESSÃO GÊNICA; FIBRAS MUSCULARES; REAÇÃO EM CADEIA POR POLIMERASE
  • Language: Português
  • Abstract: Os microRNAs (miRNAs) são pequenos RNAs não codificadores, de cerca de 20 bases de comprimento, capazes de regular negativamente a expressão gênica após a transcrição. A ação regulatória destas moléculas é indispensável para o funcionamento adequado de diversos processos biológicos, dentre eles o desenvolvimento e a manutenção da musculatura esquelética. Com o objetivo de caracterizar a população de miRNAs presentes na musculatura esquelética adulta de frangos, foi construída uma biblioteca de miRNAs a partir do músculo peitoral de indivíduos jovens (21 dias pós-eclosão). Um total de 576 clones foi sequenciado e as sequências obtidas foram agrupadas por similaridade em 98 grupos, dentre os quais 47 corresponderam à miRNAs conhecidos, 30 à outros tipos de RNA e seis à possíveis novos miRNAs. Estes dados poderão subsidiar estudos funcionais subsequentes, que visem entender a função exercida por cada uma destas moléculas na musculatura esquelética. Buscando-se associar a ocorrência e expressão dos miRNAs ao controle da miogênese, foi analisada a expressão de três miRNAs identificados na biblioteca (miR-125b, miR-221 e miR-206), envolvidos na regulação do balanço entre proliferação e diferenciação celular, mecanismo determinante da miogênese. A análise foi realizada por PCR quantitativa em diferentes estádios do desenvolvimento (nove e 17 dias embrionário e 21 dias pós-eclosão) e entre duas linhagens de frango com potencial divergente para crescimento e ganho demassa muscular continua... ) Não houve diferença significativa na expressão dos miRNAs entre as linhagens em nenhum dos estádios aferidos, entretanto, foi possível traçar a ontogenia destas moléculas ao longo do desenvolvimento do animal, o que permitiu inferências sobre as condições morfológicas e fisiológicas das células musculares em cada um dos estádios analisados. Por fim, com o objetivo de associar os dados de expressão obtidos para os miRNAs, à variações na expressão de genes alvo, aferimos a expressão de três genes: SRF, Fstl e Pola1; onde o primeiro é regulado pelo miR-133a (cuja expressão não foi aferida devido à questões metodológicas) e os dois últimos pelo miR-206. A análise foi feita também por PCR quantitativa, entre as linhagens e em diferentes estádios do desenvolvimento. Foi possível visualizar, apenas nos estádios embrionários, a relação entre a expressão do miR-206 e seus genes alvo, com uma coerência entre o aumento na expressão do miR-206 e a diminuição na expressão de Pola1 e Fstl1. A determinação do perfil de expressão dos três genes ao longo do desenvolvimento muscular permitiu inferências sobre a ação destas moléculas no balanço entre proliferação e diferenciação nas linhagens de corte e postura
  • Imprenta:
  • Data da defesa: 10.06.2009
  • Acesso online ao documento

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    Exemplares físicos disponíveis nas Bibliotecas da USP
    BibliotecaCód. de barrasNúm. de chamada
    CENA12800011105-Se.2 Referncia 11027
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    • ABNT

      ANDREOTE, Ana Paula Dini; COUTINHO, Luiz Lehmann. Identificação de microRNAs na musculatura esquelética de Gallus gallus. 2009.Universidade de São Paulo, Piracicaba, 2009. Disponível em: < http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/64/64133/tde-02102009-153144/ >.
    • APA

      Andreote, A. P. D., & Coutinho, L. L. (2009). Identificação de microRNAs na musculatura esquelética de Gallus gallus. Universidade de São Paulo, Piracicaba. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/64/64133/tde-02102009-153144/
    • NLM

      Andreote APD, Coutinho LL. Identificação de microRNAs na musculatura esquelética de Gallus gallus [Internet]. 2009 ;Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/64/64133/tde-02102009-153144/
    • Vancouver

      Andreote APD, Coutinho LL. Identificação de microRNAs na musculatura esquelética de Gallus gallus [Internet]. 2009 ;Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/64/64133/tde-02102009-153144/