Avaliação do efeito do flúor na diferenciação de osteoblastos a partir de células mesenquimais da medula óssea (2009)
- Authors:
- Autor USP: BUZALAF, MARILIA AFONSO RABELO - FOB
- Unidade: FOB
- Subjects: FLÚOR; MEDULA ÓSSEA; DIFERENCIAÇÃO CELULAR; OSTEOBLASTO
- Language: Português
- Abstract: 1. Objetivos O objetivo deste trabalho foi avaliar in vitro, o efeito do F na diferenciação das células mesenquimais, obtidas das linhagens de camundongos A/J e 129P3/J. 2. Materiais e Métodos Foram utilizados camundongos fêmeas com idade entre 4-6 semanas das linhagens A/J e 129P3/J, considerados susceptíveis e resistentes aos efeitos do F, respectivamente (MOUSNY et al., 2006). A medula óssea foi extraída assepticamente a partir dos ossos longos (fêmur e tíbia), utilizando a técnica de \201Cflush out\201D (MUKHERJEE et al., 2008). As células recém-coletadas foram mantidas no gelo em meio \03B1-MEM (Gibco), suplementado com 15% de soro bovino fetal (SBF) e 1% de penicilina-streptomicina. A seguir as células foram centrifugadas à 4o C, a 400 x g por 10 minutos. O pellet foi cultivado com o meio acima a 37o C, 5% CO2 em garrafas de cultura. Quando confluentes, foi realizada a passagem das células utilizando 0,25% tripsina/1mM EDTA por 5 minutos a 37o C. As células foram cultivadas por 9 passagens sucessivas e utilizadas para a caracterização fenotípica e ensaios experimentais. O primeiro foi feito, utilizando anticorpos de marcação anti-CD73, anti-Sca-1, anti-CD44, anti-CD45, anti-CD90. 1, anti-CD34 e anti-CD105 e analisados por citometria de fluxo. Para o ensaio de diferenciação, 4x104 células foram cultivadas em placas de 12 poços em meio osteogênico (\03B1-MEM/15% SBF acrescido de 50 \03BCg/ml de ácido ascórbico, 10-7M dexametasona e 7 mM \03B2-glicerofosfato) na presença ou não de diferentes concentrações de F(10-3, 10-5 e 10-7 M, na forma de NaF). Após 21 dias, a deposição de cálcio extracelular foi avaliada pela coloração com Alizared red S (Sigma). 3. Resultados Após 9 passagens, as células de ambas linhagens de animais apresentaram-se homogêneas e positivas para os marcadores CD105, CD73, CD44, CD90.1 e Sca-1 e negativas para os marcadores de precursoreshematopoiéticos CD43 e CD45 demonstrando a pureza da população celular. Com relação à diferenciação, células provenientes dos animais A/J foram mais efetivas em promover a mineralização (deposição de cálcio) quando comparado com as células dos animais 129P3/J. O tratamento das células provenientes dos animais 129P3/J com F aumentou a deposição de Ca de maneira dose dependente (10-5> 10-7> 10-3 M). Já nas células dos animais A/J, o tratamento com F inibiu a deposição de Ca, em todas as concentrações estudadas. 4. Conclusão Através dos resultados obtidos até o momento, pode-se concluir que o protocolo de cultivo e expansão das células mesenquimais primárias a partir da medula óssea foi eficiente em promover a purificação da população celular. Além disso, o tratamento das células com F, em baixas concentrações, aumenta e inibe a mineralização óssea nos animais 129P3/J e A/J, respectivamente. Experimentos futuros irão avaliar os mecanismos moleculares envolvidos neste efeito do F, do tipo linhagemdependente
- Imprenta:
- Publisher: Universidade de São Paulo
- Publisher place: São Paulo
- Date published: 2009
- Source:
- Título do periódico: Resumos
- Conference titles: Simpósio Internacional de Iniciação Científica da Universidade de São Paulo - SIICUSP
-
ABNT
OLIVEIRA, Fabiana Amadeu de e BUZALAF, Marília Afonso Rabelo e BUZALAF, Camila Peres. Avaliação do efeito do flúor na diferenciação de osteoblastos a partir de células mesenquimais da medula óssea. 2009, Anais.. São Paulo: Universidade de São Paulo, 2009. . Acesso em: 28 mar. 2024. -
APA
Oliveira, F. A. de, Buzalaf, M. A. R., & Buzalaf, C. P. (2009). Avaliação do efeito do flúor na diferenciação de osteoblastos a partir de células mesenquimais da medula óssea. In Resumos. São Paulo: Universidade de São Paulo. -
NLM
Oliveira FA de, Buzalaf MAR, Buzalaf CP. Avaliação do efeito do flúor na diferenciação de osteoblastos a partir de células mesenquimais da medula óssea. Resumos. 2009 ;[citado 2024 mar. 28 ] -
Vancouver
Oliveira FA de, Buzalaf MAR, Buzalaf CP. Avaliação do efeito do flúor na diferenciação de osteoblastos a partir de células mesenquimais da medula óssea. Resumos. 2009 ;[citado 2024 mar. 28 ] - Incorporação de fluoreto de cálcio ao esmalte dentário após o uso de dentríficio fluoretado, precedido por bochecho com cálcio ou não
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