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Produção, caracterização e aplicação analítica de anticorpos monoclonais anti-´βIND.2´-glicoproteína I (2010)

  • Authors:
  • USP affiliated authors: STELLA, CAROLINA NIGRO - FCF
  • USP Schools: FCF
  • Sigla do Departamento: FBC
  • Subjects: IMUNOLOGIA; ANTICORPOS MONOCLONAIS (PRODUÇÃO;CARACTERÍSTICAS;IMUNOLOGIA); IMUNOHISTOQUÍMICA (TESTES); GLICOPROTEÍNAS (METABOLISMO;IMUNOLOGIA)
  • Language: Português
  • Abstract: Anticorpos monoclonais (AcMo) anti-´βIND.2´GPI foram obtidos de hibridomas produzidos pela fusão de linfócitos de camundongos com células SP2-O, de mieloma murino. A imunização foi realizada com proteína purificada de plasma humano, por cromatografia de afinidade em resina Sepharose-Heparina 6 Fast Flow (GE Healthcare). Os AcMo produzidos pelos hibridomas ´KIND.2´57, ´KIND.2´II-3, ´KIND.2´33, ´KIND.2´2, ´KIND.2´37 e ´KIND.2´124 foram estudados quanto à sua capacidade de reconhecer o antígeno adsorvido em suporte sólido (dot-blot, imunoblot, ELISA direto) e em solução (ELISA indireto). Todos os clones foram cultivados e expandidos in vivo (ascite) e in vitro (cultura convencional). Pretende-se a substituição da expansão in vivo pela produção em biorreator. Os AcMo produzidos reconheceram a ´βIND.2´GPI em imunoblot com sensibilidade e especificidade variáveis. O desempenho dos AcMo ´KIND.2´2 e ´KIND.2´124 no reconhecimento da proteína adsorvida em placas de ELISA (Maxisorp, NUNC), mostrou-se promissor para o desenvolvimento de um teste ELISA direto (sanduíche), em substituição ao ELISA indireto (competição) atualmente utilizado. O AcMo ´KIN.2´2 mostrou reatividade semelhante à do anticorpo comercial 5F7 (ICN) em todos os testes realizados. Tanto o anticorpo produzido pelo clone ´KIND.2´2 quanto seus fragmentos Fab, obtidos através de digestão enzimática, foram utilizados para identificação e quantificação da proteína em plasma e tecidos de ratos submetidos a um modelo de sepse e translocação bacteriana. Os resultados obtidos demonstram que a modulação das concentrações plasmáticas de ´βIND.2´GPI e sua distribuição hepática dependem da intensidade e da via de infecção, e sugerem a presença de imunocomplexos da proteína in vivo
  • Imprenta:
  • Data da defesa: 26.03.2010
  • Acesso online ao documento

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    Exemplares físicos disponíveis nas Bibliotecas da USP
    BibliotecaCód. de barrasNúm. de chamada
    CQ30100016729T615.37 S824p
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    • ABNT

      STELLA, Carolina Nigro; GOMES, Ligia Ferreira. Produção, caracterização e aplicação analítica de anticorpos monoclonais anti-´βIND.2´-glicoproteína I. 2010.Universidade de São Paulo, São Paulo, 2010. Disponível em: < http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/9/9136/tde-22042010-103017/ >.
    • APA

      Stella, C. N., & Gomes, L. F. (2010). Produção, caracterização e aplicação analítica de anticorpos monoclonais anti-´βIND.2´-glicoproteína I. Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/9/9136/tde-22042010-103017/
    • NLM

      Stella CN, Gomes LF. Produção, caracterização e aplicação analítica de anticorpos monoclonais anti-´βIND.2´-glicoproteína I [Internet]. 2010 ;Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/9/9136/tde-22042010-103017/
    • Vancouver

      Stella CN, Gomes LF. Produção, caracterização e aplicação analítica de anticorpos monoclonais anti-´βIND.2´-glicoproteína I [Internet]. 2010 ;Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/9/9136/tde-22042010-103017/

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