Acetilcolinesterase imobilizada em capilares de sílica fundida: novo formato para triagem de inibidores seletivos (2011)
- Authors:
- Autor USP: SILVA, JOYCE IZIDORO DA - FFCLRP
- Unidade: FFCLRP
- Sigla do Departamento: 593
- Subjects: ACETILCOLINA; IMOBILIZAÇÃO; INIBIDORES DE ENZIMAS; DOENÇA DE ALZHEIMER
- Language: Português
- Abstract: Este trabalho descreve o desenvolvimento de biorreatores capilares com a enzima acetilcolinesterase (AChE) covalentemente imobilizada sobre as paredes internas de capilares de sílica fundida utilizando como espaçador o agente homobifuncional glutaraldeído. Os biorreatores desenvolvidos foram acoplados num sistema de cromatografia de alta eficiência com detecção UV - vis. O efeito da imobilização sobre o comportamento da enzima com relação a parâmetros como valor de pH Étimo, estabilidade em diferentes tampões, estabilidade em solventes orgânicos e estudos cinéticos foi avaliado e comparado com a enzima na sua forma livre. Os valores de ‘K IND. M’ obtidas evidenciaram que o método de imobilização covalente embora tenha afetado a afinidade pelo substrato não comprometeu a aplicação dos biorreatores obtidos na triagem de ligantes. Além disso, para o biorreator preparado com a enzima acetilcolinesterase de peixe elétrico (Electrophorus electricus) houve um expressivo aumento da estabilidade da enzima imobilizada com retenção de 78% da atividade enzimática inicial por 12 meses. Também foram preparados biorreatores com a enzima acetilcolinesterase de eritrócitos humanos, que no entanto apresentou estabilidade por menor período de tempo, aproximadamente 60 dias. Para ambos biorreatores o método foi validado para aplicação no estudo de inibição e determinação da potência inibitória (‘IC IND. 50’) de inibidores padrões da enzima acetilcolinesterase, além da avaliação de coleções de compostos derivados das classes de cumarinas e alcalóides e extratos naturais. Os resultados mostraram que os biorreatores desenvolvidos além de representar uma ótima alternativa para a preservar a atividade enzimática, podem ser utilizados na triagem automatizada de ligantes sejam sintéticos ou naturais com maior precisão e reprodutibilidade
- Imprenta:
- Publisher place: Ribeirão Preto
- Date published: 2011
- Data da defesa: 27.04.2011
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ABNT
SILVA, Joyce Izidoro da. Acetilcolinesterase imobilizada em capilares de sílica fundida: novo formato para triagem de inibidores seletivos. 2011. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2011. . Acesso em: 07 maio 2024. -
APA
Silva, J. I. da. (2011). Acetilcolinesterase imobilizada em capilares de sílica fundida: novo formato para triagem de inibidores seletivos (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. -
NLM
Silva JI da. Acetilcolinesterase imobilizada em capilares de sílica fundida: novo formato para triagem de inibidores seletivos. 2011 ;[citado 2024 maio 07 ] -
Vancouver
Silva JI da. Acetilcolinesterase imobilizada em capilares de sílica fundida: novo formato para triagem de inibidores seletivos. 2011 ;[citado 2024 maio 07 ]
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