Identificação, clonagem e análise da expressão de proteínas-CPI de Paracoccidioides brasiliensis (2011)
- Authors:
- Autor USP: REIS, THAILA FERNANDA DOS - FMRP
- Unidade: FMRP
- Sigla do Departamento: RBP
- Subjects: PARACOCCIDIOIDES BRASILIENSIS; EXPRESSÃO GÊNICA
- Language: Português
- Abstract: Em fungos, proteínas modificadas por GPI são proteínas abundantes da parede celular que compartilham características estruturais que permitem a sua identificação através de análise de bioinformática. Nós utilizamos seqüências consenso para o sítio de inserção de GPI na porção C-terminal (sítio-‘ômega’) de cada proteína para pesquisar o genoma de P. brasiliensis, um fungo termodimórfico que causa a paracoccidioidomicose (PCM). As proteínas identificadas foram analisadas quanto a ausência de domínio transmembrana e presença de peptídeo sinal para secreção. Utilizando esta abordagem nós identificamos 72 prováveis proteínas GPI. Algumas dessas proteínas apresentam alta homologia a proteínas GPI conhecidas de outras espécies de ascomicetos. Análise de PCR em tempo real de 30 genes que codificam proteínas GPI revelou que o nível dos transcritos de 13 deles foi maior na forma micelial e 4 genes foram mais expressos na forma patogênica leveduriforme. Nós clonamos 29 ORFs que codificam proteínas-GPI de P. brasiliensis em vetor de entrada do sistema Gateway. Destas, 28 foram transferidas para um vetor destino para expressão em levedura o qual contem uma cauda de GST N-terminal. Das ORFs clonadas, 25 proteínas de fusão foram altamente expressas em levedura e purificadas por cromatografia de afinidade. Esta coleção de clones móveis servirá como importante fonte para estudos adicionais de função e imunogenicidade de proteínas-GPI de P. brasiliensis
- Imprenta:
- Publisher place: Ribeirão Preto
- Date published: 2011
- Data da defesa: 27.05.2011
-
ABNT
REIS, Thaila Fernanda dos. Identificação, clonagem e análise da expressão de proteínas-CPI de Paracoccidioides brasiliensis. 2011. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2011. . Acesso em: 29 mar. 2024. -
APA
Reis, T. F. dos. (2011). Identificação, clonagem e análise da expressão de proteínas-CPI de Paracoccidioides brasiliensis (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. -
NLM
Reis TF dos. Identificação, clonagem e análise da expressão de proteínas-CPI de Paracoccidioides brasiliensis. 2011 ;[citado 2024 mar. 29 ] -
Vancouver
Reis TF dos. Identificação, clonagem e análise da expressão de proteínas-CPI de Paracoccidioides brasiliensis. 2011 ;[citado 2024 mar. 29 ] - Expressão e purificação da septina Cdc12 de paracoccidioides brasiliensis em escherichia coli
- The Aspergillus fumigatus Mismatch repair MSH2 homolog is important for virulence and azole resistance
- In silico identification of glycosylphosphatidylinositol-anchored proteins in Paracoccidioides spp
- GPCR-mediated glucose sensing system regulates light-dependent fungal development and mycotoxin production
- Secondary metabolites produced during Aspergillus fumigatus and Pseudomonas aeruginosa biofilm formation
- The influence of genetic stability on aspergillus fumigatus virulence and azole resistance
- The Aspergillus fumigatus phosphoproteome reveals roles of high-osmolarity glycerol mitogen-activated protein kinases in promoting cell wall damage and caspofungin tolerance
- Identification of glucose transporters in Aspergillus nidulans
- Characterization of a novel sugar transporter involved in sugarcane bagasse degradation in Trichoderma reesei
- Pathogenic allodiploid hybrids of Aspergillus fungi
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