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Identificação, clonagem e análise da expressão de proteínas-CPI de Paracoccidioides brasiliensis (2011)

  • Authors:
  • USP affiliated authors: REIS, THAILA FERNANDA DOS - FMRP
  • USP Schools: FMRP
  • Sigla do Departamento: RBP
  • Subjects: PARACOCCIDIOIDES BRASILIENSIS; EXPRESSÃO GÊNICA
  • Language: Português
  • Abstract: Em fungos, proteínas modificadas por GPI são proteínas abundantes da parede celular que compartilham características estruturais que permitem a sua identificação através de análise de bioinformática. Nós utilizamos seqüências consenso para o sítio de inserção de GPI na porção C-terminal (sítio-‘ômega’) de cada proteína para pesquisar o genoma de P. brasiliensis, um fungo termodimórfico que causa a paracoccidioidomicose (PCM). As proteínas identificadas foram analisadas quanto a ausência de domínio transmembrana e presença de peptídeo sinal para secreção. Utilizando esta abordagem nós identificamos 72 prováveis proteínas GPI. Algumas dessas proteínas apresentam alta homologia a proteínas GPI conhecidas de outras espécies de ascomicetos. Análise de PCR em tempo real de 30 genes que codificam proteínas GPI revelou que o nível dos transcritos de 13 deles foi maior na forma micelial e 4 genes foram mais expressos na forma patogênica leveduriforme. Nós clonamos 29 ORFs que codificam proteínas-GPI de P. brasiliensis em vetor de entrada do sistema Gateway. Destas, 28 foram transferidas para um vetor destino para expressão em levedura o qual contem uma cauda de GST N-terminal. Das ORFs clonadas, 25 proteínas de fusão foram altamente expressas em levedura e purificadas por cromatografia de afinidade. Esta coleção de clones móveis servirá como importante fonte para estudos adicionais de função e imunogenicidade de proteínas-GPI de P. brasiliensis
  • Imprenta:
  • Data da defesa: 27.05.2011

  • Exemplares físicos disponíveis nas Bibliotecas da USP
    BibliotecaCód. de barrasNúm. de chamada
    FMRP11200057561Reis, Thaila Fernanda dos
    How to cite
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    • ABNT

      REIS, Thaila Fernanda dos; COELHO, Paulo Sérgio Rodrigues. Identificação, clonagem e análise da expressão de proteínas-CPI de Paracoccidioides brasiliensis. 2011.Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2011.
    • APA

      Reis, T. F. dos, & Coelho, P. S. R. (2011). Identificação, clonagem e análise da expressão de proteínas-CPI de Paracoccidioides brasiliensis. Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto.
    • NLM

      Reis TF dos, Coelho PSR. Identificação, clonagem e análise da expressão de proteínas-CPI de Paracoccidioides brasiliensis. 2011 ;
    • Vancouver

      Reis TF dos, Coelho PSR. Identificação, clonagem e análise da expressão de proteínas-CPI de Paracoccidioides brasiliensis. 2011 ;