Avaliação in vitro da atividade bactericida de bacteriófago lítico contra cepas multirresistentes de P. aeruginosa (2011)
- Authors:
- USP affiliated authors: MAMIZUKA, ELSA MASAE - FCF ; HUENUMAN, NILTON ERBET LINCOPAN - ICB
- Unidades: FCF; ICB
- Subjects: PSEUDOMONAS; MICROBIOLOGIA
- Language: Português
- Abstract: Isolados de Pseudomonas aeruginosa multirresistente encontram-se disseminados no Brasil. Conseqüentemente, a produção de metalo-beta-lactamases (MBLs) e metilases RNAr 16S, a superexpressão de bombas de efluxo, e a perda de porinas (OprD-) têm contribuído com a endemicidade de fenótipos multirresistentes (MR), e falhas terapêuticas decorrentes. O objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade, in vitro, de bacteriófagos líticos contra cepas de P. aeruginosa MR apresentando diferentes mecanismos de resistência aos carbapenêmicos. Métodos: Foram utilizadas nesse estudo, sete cepas de P. aeruginosa MR não relacionadas clonalmente, recuperadas de amostras clínicas (n=6) e ambientais (n=1). Adicionalmente, foram incluídas cinco cepas controle [ATCC 27853, Pa01, 48-1997A EPM (blaSPM-1), 319 EPM (blaIMP-1) e Pa0905 (blaSPM-1/rmtD1)]. Fenótipos e genótipos de resistência a carbapenêmicos e aminoglicosídeos foram caracterizados por diluição em ágar (CLSI), PCR e sequenciamento, SDS-PAGE para análise de porinas, e RT-qPCR para avaliar a superexpressão de bombas de efluxo. A relação clonal entre as cepas foi avaliada por ERIC-PCR.O isolamento, a propagação e a titulação de fagos líticos foram realizados como descrito por Bergan. A atividade bactericida do fago foi avaliada por determinação da concentração bactericida mínima e ensaios de curva de morte em função do tempo para uma concentração bacteriana fixa de 1 x 105 ufc/mL em uma diluição do bacteriófago de 10 x RTD. Resultados: A produção de MBLs (SPM-1 e VIM-1), produção de metilase 16S rRNA RmtD1, a ausência da porina OprD, e a superexpressão da bomba de efluxo MexEF-OprN foram confirmados como os principais mecanismos de resistência responsáveis pelo fenótipo carbapenem resistente (imipenem MIC50 64 µg/mL), tanto nos isolados clínicos quanto no isolado ambiental. Surpreendentemente, o fago lítico mostrou atividade bactericida contra três cepas clínicas [(SPM-1/RmtD1/OprD-/superprodução de mexEF-OprN); (SPM-1/RmtD/OprD-), e (VIM-1/OprD-)], uma cepa ambiental (SPM-1/RmtD1), e contra as cinco cepas controle, requerendo apenas duas horas para atingir 100% de atividade bactericida. Por outro lado, a atividade lítica do fago foi seletiva contra P. aeruginosa não se observando toxicidade contra células eucarióticas (hemácias humanas). Conclusões: Na ausência de agentes antimicrobianos eficazes contra P. aeruginosa MR, fagos líticos tem potencial terapêutico digno de investigação
- Imprenta:
- Publisher: Sociedade Brasileira de Microbiologia (SBM)
- Publisher place: São Paulo
- Date published: 2011
- Conference titles: Congresso Brasileiro de Microbiologia
-
ABNT
NEVES, Patrícia R et al. Avaliação in vitro da atividade bactericida de bacteriófago lítico contra cepas multirresistentes de P. aeruginosa. 2011, Anais.. São Paulo: Sociedade Brasileira de Microbiologia (SBM), 2011. . Acesso em: 23 abr. 2024. -
APA
Neves, P. R., Mamizuka, E. M., Levy, C. E., & Huenuman, N. E. L. (2011). Avaliação in vitro da atividade bactericida de bacteriófago lítico contra cepas multirresistentes de P. aeruginosa. In . São Paulo: Sociedade Brasileira de Microbiologia (SBM). -
NLM
Neves PR, Mamizuka EM, Levy CE, Huenuman NEL. Avaliação in vitro da atividade bactericida de bacteriófago lítico contra cepas multirresistentes de P. aeruginosa. 2011 ;[citado 2024 abr. 23 ] -
Vancouver
Neves PR, Mamizuka EM, Levy CE, Huenuman NEL. Avaliação in vitro da atividade bactericida de bacteriófago lítico contra cepas multirresistentes de P. aeruginosa. 2011 ;[citado 2024 abr. 23 ] - Pseudomonas aeruginosa multirresistente: um problema endêmico no Brasil
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