Caracterização funcional de culturas de células tumorais de suprarrenal obtidas de fragmentos de tumores de pacientes (2011)
- Authors:
- Autor USP: LOTFI, CLAUDIMARA FERINI PACICCO - ICB
- Unidade: ICB
- Assunto: ANATOMIA
- Language: Português
- Abstract: Neoplasias adrenocorticais apresentam uma taxa de incidência maior no Brasil do que em relação ao resto do mundo [1]. A distinção entre carcinomas e adenomas é essencial, no entanto difícil, pois os métodos utilizados não são suficientemente eficazes. Os estudos na maioria das vezes são limitados a um pequeno número de amostras e pouco progresso tem sido feito. Modelos in vitro podem ser promissores para esse tipo de problema. Neste trabalho foi realizada uma das etapas de caracterização de culturas de células de tumores adrenocorticais que é sua capacidade de síntese e secreção de esteróides no meio de cultura. Células tumorais adrenocorticais de diferentes passagens foram plaqueadas em placas de Petri (60 mm) contendo um volume final de 5mL de meio (DMEM-10%SFB). As culturas foram mantidas por 5 dias sem troca de meio e foram realizados estímulos hormonais diários por 4 dias. As células foram estimuladas com 10-9M de Angiotensina 2 (AngII) ou corticotropina (ACTH1-39) ou Forscolina (Frk). O meio foi coletado e analisado por espectrometria de massas e cromatografia líquida de alta pressão para detecção e quantificação dos esteróides: testosterona, desoxicortisol (DCL), androstenediona (AND), cortisol e desoxicorticosterona (DCA). As células contidas nas placas foram lisadas com tampão de lise RIPA contendo inibidores de proteases e fosfatases para extração da proteína total seguida de quantificação óptica. A concentração de hormônio secretado foi calculada em relação à quantidade de proteína total. As culturas utilizadas nos experimentos foram 2 adenomas (T7,T50), 2 metástases de de adrenal no pulmão (T10, T19) e 2 carcinomas (T12,T53). Somente a cultura T7 [2] foi submetida à indução por hormônios. Figura 1 – Secreção de AND nas culturas estudadasTodos os tipos celulares secretaram AND, mas somente T53 e T50 secretaram também DCL e DCA. Nos ensaios hormonais com T7 para um mesmo subcultivo houve tendência a aumento da secreção de AND com aplicações de AngII, e pouca ou nenhuma variação em presença de Frk ou ACTH. Foi obtida com o aumento dos subcultivos a diminuição da secreção de AND, independente do estímulo hormonal. O perfil funcional de culturas celulares de tumores adrenocorticais varia bastante dependendo das características de cada tumor, do número de subcultivos e também das condições de cultivo (presença ou não de hormônios). Existe uma tendência a perda da capacidade em sintetizar e secretar esteróides quanto maior seu subcultivo, ou seja, perda de função.
- Imprenta:
- Publisher: Universidade de São Paulo
- Publisher place: São Paulo
- Date published: 2011
- Conference titles: científica da USP (SIICUSP)
-
ABNT
CARNEIRO, Eduardo T. e LOTFI, Claudimara Ferini Pacicco. Caracterização funcional de culturas de células tumorais de suprarrenal obtidas de fragmentos de tumores de pacientes. 2011, Anais.. São Paulo: Universidade de São Paulo, 2011. . Acesso em: 26 abr. 2024. -
APA
Carneiro, E. T., & Lotfi, C. F. P. (2011). Caracterização funcional de culturas de células tumorais de suprarrenal obtidas de fragmentos de tumores de pacientes. In . São Paulo: Universidade de São Paulo. -
NLM
Carneiro ET, Lotfi CFP. Caracterização funcional de culturas de células tumorais de suprarrenal obtidas de fragmentos de tumores de pacientes. 2011 ;[citado 2024 abr. 26 ] -
Vancouver
Carneiro ET, Lotfi CFP. Caracterização funcional de culturas de células tumorais de suprarrenal obtidas de fragmentos de tumores de pacientes. 2011 ;[citado 2024 abr. 26 ] - Involvement of map kinases pathway mediated by acth and FGF2 in rat adrenal primary culture cells
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