Expressão de um fragmento da Miosina Va inibe o crescimento de tumores de melanoma induzidos em modelo animal (2012)
- Authors:
- Autor USP: BORGES, ANTÔNIO CARLOS - FMRP
- Unidade: FMRP
- Sigla do Departamento: RBP
- Subjects: APOPTOSE; MIOSINA; MELANOMA; NEOPLASIAS
- Keywords: apoptosis; cancer; gene therapy; melanoma; miosina Va; myosin Va; terapia gâmica; Tet-On
- Language: Português
- Abstract: A miosina Va é uma proteína motora envolvida no transporte e posicionamento de Articulas, organelas e mRNA. Além disso, postulou-se que a miosina-Va atua no seqüestro do fator pró-apoptótico, Bmf, no citoesqueleto de actina. Pesquisas realizadas em nosso laboratório demonstraram que um fragmento da miosina Va (MVaf), que corresponde ao sitio ligante de DLC2-Bmf, é capaz de induzir intensa apoptose em células de melanoma e de carcinoma in vitro. O presente trabalho teve par objetivo principal avaliar o potencial do MVaf como agente antitumoral, através de abordagens de terapia gênica em modelo animal. Foram geradas linhagens estabilizadas e com expressão controlada pelo sistema Tet-ON onde a expressão de EGFP ou EGFP-MVaf é induzida com a adição de doxiciclina. Essas linhagens foram tomadas quanto à porcentagem de morte por apoptose e ativação de caspases. Tumores foram induzidos em camundongos C57BL/6 por inoculação subcutânea de células tumorigênicas positivas ou não para a expressão de EGFP-MVaf. Também foram utilizadas linhagens de fibroblasto embrionário murino selvagem (MEFs WT) e nocautes para os fatores Bim/Bmf e Bax/Bak (‘MEFs POT. Bim-/-,Bmf-/-’; ‘MEFs POT. Bax-/-,Bak-/-’) para estudos do mecanismo de ação do fragmento da miosina Va. Observou-se que a adição de butirato de sódio potencializa a expressão de EGFP-MVaf e, conseqüentemente, o efeito pró-apoptótico desse fragmento e que essas células são mais sensíveis aos quimioterápicos etoposideo e taxol, apresentando maior susceptibilidade à apoptose. Verificou-se que a expressão de EGFP-MVaf em células de tumores de melanoma induzidos em camundongos C57BL/6J dificulta o crescimento desses tumores. Quanto ao estudo com MEFs, observou-se que células nocautes para os fatores pró-apoptóticos Bim/Bmf e Bax/Bak são menos susceptíveis à morte induzida pelo fragmento da miosina Va. indução da expressão de MVaf desencadeiaa liberação da proteina proapoptótica Smac (fusionada ao repórter fluorescente Cherry) do espaço intermembranas da mitocôndria para o citoplasma sugerindo que a morte apoptótica induzida por MVaf requer a permeabilização da membrana mitocondrial externa (MOMP). Concluindo, os dados apresentados aqui nos permitem propor o MVaf como uma molécula promissora para o desenvolvimento de novas abordagens terapêuticas contra o câncer
- Imprenta:
- Publisher place: Ribeirão Preto
- Date published: 2012
- Data da defesa: 27.01.2012
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ABNT
BORGES, Antônio Carlos. Expressão de um fragmento da Miosina Va inibe o crescimento de tumores de melanoma induzidos em modelo animal. 2012. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2012. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17136/tde-10022012-135441/. Acesso em: 28 mar. 2024. -
APA
Borges, A. C. (2012). Expressão de um fragmento da Miosina Va inibe o crescimento de tumores de melanoma induzidos em modelo animal (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17136/tde-10022012-135441/ -
NLM
Borges AC. Expressão de um fragmento da Miosina Va inibe o crescimento de tumores de melanoma induzidos em modelo animal [Internet]. 2012 ;[citado 2024 mar. 28 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17136/tde-10022012-135441/ -
Vancouver
Borges AC. Expressão de um fragmento da Miosina Va inibe o crescimento de tumores de melanoma induzidos em modelo animal [Internet]. 2012 ;[citado 2024 mar. 28 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/17/17136/tde-10022012-135441/
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