Efeito do agonista da via Hedgehog, purmorfamina, na diferenciação osteogênica de células-tronco mesenquimais e osteoblastos (2012)
- Authors:
- Autor USP: OLIVEIRA, FABIOLA SINGARETTI DE - FMRP
- Unidade: FMRP
- Sigla do Departamento: RFA
- Subjects: OSTEOBLASTO; CÉLULAS-TRONCO; IMUNOLOGIA CELULAR; EXPRESSÃO GÊNICA; FÁRMACOS (AGONISTAS)
- Language: Português
- Abstract: A via de sinalização Hedgehog (Hh) está envolvida, em vertebrados, no desenvolvimento de órgãos e membros assim como na formação do esqueleto. A regulação da via Hh é feita pela proteína inibitória Patched-1 (Ptch1) e a proteína Smoothened (Smo) é responsável pela ativação da cascata de transdução de sinal. Estudos in vitro sugerem que a ativação da via Hh é dependente do estágio de diferenciação osteogênica e da espécie avaliada. Portanto, o objetivo do presente estudo foi investigar o papel da via de sinalização Hh em células de humanos e de rato, ambas em estágios de diferenciação osteogênica distintos. Para isso, optou-se por modular a via Hh pela estimulação ou bloqueio de Smo, com purmorfamina e KAAD-Cyclopamine, respectivamente. Células-tronco mesenquimais (CTM) e osteoblastos, derivados de humanos e de ratos, foram cultivados em presença de veículo (dimetilsulfóxido) ou 2 ‘mu’M de purmorfamina, por períodos de até 21 dias. Foram avaliados os seguintes parâmetros: expressão do gene GLI1, envolvido na ativação da via Hh, e dos genes marcadores de osteoblastos, runt-related transcription factor 2 (RUNX2) e alkaline phosphatase (ALP), atividade de fosfatase alcalina (ALP) e formação de matriz mineralizada. Os dados foram submetidos ao teste de Mann Witney ou ao teste t, seguido de correção de Benjamini e Hochberg ou ainda ao teste de Kruskall-Wallis, sendo o nível de significância considerado 5%. Os resultados mostraram que o agonista da via Hh, purmorfamina, promove a ativação da via, observada pelo aumento da expressão do gene GLI1, em todos os tipos celulares avaliados. Entretanto, na dependência do estágio de diferenciação osteogênica (CTM e osteoblastos) e da espécie (humano e rato), o perfil de expressão dos genes marcadores de osteoblastos foi diferente. Ainda, a purmorfamina aumentou a expressão de marcadores do fenótipo osteoblástico,como a atividade de ALP mineralização, apenas em celulas derivadas de ratos. Os resultados sugerem que a participação da via Hh no processo de diferenciação osteogênica dependente da espécie e do estágio de diferenciação osteogênica
- Imprenta:
- Publisher place: Ribeirão Preto
- Date published: 2012
- Data da defesa: 28.02.2012
-
ABNT
OLIVEIRA, Fabíola Singaretti de. Efeito do agonista da via Hedgehog, purmorfamina, na diferenciação osteogênica de células-tronco mesenquimais e osteoblastos. 2012. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2012. . Acesso em: 26 abr. 2024. -
APA
Oliveira, F. S. de. (2012). Efeito do agonista da via Hedgehog, purmorfamina, na diferenciação osteogênica de células-tronco mesenquimais e osteoblastos (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. -
NLM
Oliveira FS de. Efeito do agonista da via Hedgehog, purmorfamina, na diferenciação osteogênica de células-tronco mesenquimais e osteoblastos. 2012 ;[citado 2024 abr. 26 ] -
Vancouver
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