Desenvolvimento de micobacteriófago recombinante para detecção rápida de bacilos da tuberculose (2011)
- Authors:
- Autor USP: SILVA, JOáS LUCAS DA - FCF
- Unidade: FCF
- Sigla do Departamento: FBC
- Subjects: TÉCNICAS E PROCEDIMENTOS DE LABORATÓRIO; TUBERCULOSE; BIOLOGIA MOLECULAR; RECOMBINAÇÃO GENÉTICA
- Language: Português
- Abstract: O diagnóstico da tuberculose por métodos tradicionais é lento e laborioso. Por outro lado, os testes moleculares são rápidos, mas com custo elevado para países em desenvolvimento. Este projeto teve o objetivo de inserir no micobacteriófago D29 o gene que codifica a proteína verde fluorescente (eGFP) e estudar o fago recombinante na detecção rápida de bacilos da tuberculose. Para tanto, foi inserido o cassete Hsp60- eGFP no genoma do fago D29 por recombinação. Micobacteriófagos recombinantes purificados foram utilizados para infectar M. smegmatis ´mcPOT.2´ 155 e M. tuberculosis H37Rv durante um período de 1- 6h nas temperaturas de 30°C, 37°C e 42°C. Bactérias fluorescentes foram observadas em um período de 2h, mas em número reduzido, indicando que o micobacteriófago lisou às células rapidamente, dificultando a expressão da eGFP e visualização em microscópio de fluorescência. A deleção do gene LysA, foi efetuada a fim de aumentar o período de latência do fago. Não foi possível a purificação de fagos recombinantes, devido à baixa quantidade de recombinantes nos halos de inibição. Será necessário a redução da atividade o gene LysA e, provavelmente, de outros genes associados a lise celular a fim de aumentar a concentração de eGFP no interior da célula
- Imprenta:
- Data da defesa: 28.11.2011
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ABNT
SILVA, Joás Lucas da. Desenvolvimento de micobacteriófago recombinante para detecção rápida de bacilos da tuberculose. 2011. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2011. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/9/9136/tde-12092012-140428/. Acesso em: 18 abr. 2024. -
APA
Silva, J. L. da. (2011). Desenvolvimento de micobacteriófago recombinante para detecção rápida de bacilos da tuberculose (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/9/9136/tde-12092012-140428/ -
NLM
Silva JL da. Desenvolvimento de micobacteriófago recombinante para detecção rápida de bacilos da tuberculose [Internet]. 2011 ;[citado 2024 abr. 18 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/9/9136/tde-12092012-140428/ -
Vancouver
Silva JL da. Desenvolvimento de micobacteriófago recombinante para detecção rápida de bacilos da tuberculose [Internet]. 2011 ;[citado 2024 abr. 18 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/9/9136/tde-12092012-140428/
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