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Aspectos moleculares, estruturais e funcionais de espermatozoides bovinos sexados por citometria de fluxo (2013)

  • Authors:
  • USP affiliated authors: CARVALHO NETO, JOSÉ DE OLIVEIRA - ESALQ
  • USP Schools: ESALQ
  • Sigla do Departamento: LZT
  • Subjects: BIOTECNOLOGIA DA REPRODUÇÃO; BOVINOS; REPRODUÇÃO ANIMAL
  • Language: Português
  • Abstract: A sexagem espermática tem um grande impacto na produção animal, pois permite a escolha do sexo dos descendentes, tendo o seu uso aumentado consideravelmente nos últimos anos. Atualmente, as taxas de blastocistos produzidos in vitro com sêmen sexado são semelhantes às com sêmen não sexado. Entretanto, quando utilizado na inseminação artificial (IA) e/ou transferência de embriões (TE) as taxas de gestação ou produção de embriões ainda são inferiores às obtidas com sêmen convencional. Esses resultados indicam que são necessários mais esclarecimentos sobre o efeito da sexagem nas células espermáticas. Este estudo teve o objetivo de avaliar possíveis alterações moleculares e funcionais dos espermatozoides causadas pelo processo de sexagem, além de tentar identificar diferenças entre espermatozoides contendo o cromossomo X ou Y. Para isto, um ejaculado de cada touro Nelore (n=4) foi colhido e separado em três frações: não sexado (NS), sexado X (SX) e sexado Y (SY), sendo utilizado em 3 experimentos. Nos experimentos 2 e 3, um quarto grupo foi formado pelo pool de espermatozoides sexados X e Y (XY). No primeiro experimento, utilizando a técnica de bisulfito de sódio, foi realizada a avaliação do padrão de metilação dos genes imprinted IGF2 e IGF2R em espermatozoides sexados e não sexados. No segundo experimento, foi avaliado o efeito da sexagem no tamanho e na forma da cabeça do espermatozoide e as possíveis diferença entre espermatozoides contendo cromossomo X ou Y. No últimoexperimento, verificou-se o efeito da sexagem espermática na longevidade dos espermatozoides mantidos em meio de cultivo por 12 horas e na sua capacidade de se ligar às células da tuba uterina (CTU). No experimento relacionado à epigenética, não foi encontrada diferença no padrão de metilação dos genes IGF2 e IGF2R. Entretanto, identificou-se um polimorfismo no gene IGF2, e um padrão de metilação específico do gene IGF2R, provavelmente devido a uma característica epigenética especifica de animais Bos indicus. No experimento 2, não foi encontrada diferença em nenhuma das 23 variáveis estudadas entre os grupo X e Y. Entretanto, usando simultaneamente diversos parâmetros por meio de análise discriminante, na tentativa de diferenciar os grupos, o modelo mais discriminante atingiu 100% de precisão na identificação de espermatozoides de cada grupo NS, SX, SY e SXY. No experimento 3 foi identificado que o processo de sexagem afeta características estruturais da célula espermática, induzindo umacapacitação e reação acrossômica. Porém, ao longo de 12 horas de cultivo, a cinética dos espermatozoides sexados foi semelhante a do sêmen convencional. Além disto, foi identificado que o processo de sexagem comprometeu a capacidade dos espermatozoides de se manterem ligados às CTU. Em relação aos espermatozoides X e Y, foi observada uma menor capacidade do grupo X de se ligar às CTU, assim como uma diferença em características relacionadas à motilidade e acrossoma. Esses resultados podemcontribuir no estabelecimento de procedimentos mais adequados para melhorar o aproveitamento e os resultados quando da utilização do sêmen sexado e em melhorias no processo de sexagem, ou mesmo no desenvolvimento de novas tecnologias para a separação de espermatozoides X ou Y
  • Imprenta:
  • Data da defesa: 28.06.2013
  • Acesso online ao documento

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    BibliotecaCód. de barrasNúm. de chamada
    ESABC10500126741t636.20824 C331a e.2 105288
    How to cite
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    • ABNT

      CARVALHO NETO, José de Oliveira; SARTORI FILHO, Roberto. Aspectos moleculares, estruturais e funcionais de espermatozoides bovinos sexados por citometria de fluxo. 2013.Universidade de São Paulo, Piracicaba, 2013. Disponível em: < http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/11/11139/tde-29082013-095902/ >.
    • APA

      Carvalho Neto, J. de O., & Sartori Filho, R. (2013). Aspectos moleculares, estruturais e funcionais de espermatozoides bovinos sexados por citometria de fluxo. Universidade de São Paulo, Piracicaba. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/11/11139/tde-29082013-095902/
    • NLM

      Carvalho Neto J de O, Sartori Filho R. Aspectos moleculares, estruturais e funcionais de espermatozoides bovinos sexados por citometria de fluxo [Internet]. 2013 ;Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/11/11139/tde-29082013-095902/
    • Vancouver

      Carvalho Neto J de O, Sartori Filho R. Aspectos moleculares, estruturais e funcionais de espermatozoides bovinos sexados por citometria de fluxo [Internet]. 2013 ;Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/11/11139/tde-29082013-095902/

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