Expressão de microRNAs da familia let-7 no vítreo de ratos Wistar durante o envelhecimento (2013)
- Authors:
- USP affiliated authors: KIMURA, EDNA TERUKO - ICB ; HAMASSAKI, DANIA EMI - ICB
- Unidade: ICB
- Subjects: BIOLOGIA CELULAR; RETINA; RATOS WISTAR; ENVELHECIMENTO CELULAR; RNA
- Language: Português
- Abstract: Introdução Os microRNAs são pequenos RNAs não codificantes que atuam sobre uma vasta gama de processos celulares através da inibição da tradução de mRNAs alvo via regulação pós-transcricional. Até o momento, poucos estudos tem descrito a função dos microRNAs no vítreo. O vítreo é uma substância gelatinosa e transparente localizada entre o cristalino e a retina. Com o envelhecimento, o vítreo sofre alterações estruturais como a gradual formação de lamelas e espaços liquefeitos, que eventualmente levam ao descolamento do vítreo posterior. Considerando que os microRNAs da família let-7 são importantes durante a tumorigênese e o envelhecimento celular, e que alguns componentes da matriz vítrea como o colágeno tipo V e IX, assim como a enzima hialuronan sintase, são alguns de seus alvos preditos, estudos desses microRNAs se fazem necessários para compreender a sua função em processos degenerativos. Objetivos O objetivo desse trabalho é investigar a influência dos microRNAs let-7 na retina e no vítreo de ratos Wistar durante o envelhecimentoMétodos Aprovado no Comitê de Ética em Experimentação Animal, CEEA protocolo no.095/131/02. Foram utilizados ratos Wistar neonatos (P1-P3, n=4), adultos (2 meses, n=6) e idosos (12 meses, n=5). Os animais foram anestesiados, os olhos enucleados e as retinas e vítreos coletados. O RNA total foi extraído utilizando Trizol e a dosagem realizada no Biomate 3 (Thermo Scientific). A expressão gênica dos microRNAs let-7a, 7b, 7c, 7d, 7e, 7f e 7i foi avaliada por PCR em tempo real (7300 Systems Applied Biosystems) através do uso de cDNA obtido por transcrição reversa direcionada e específica para cada microRNA. Para investigar se as células gliais de Müller poderiam expressar e secretar esses microRNAs do vítreo, foram realizadas culturas primárias enriquecidas dessas células e os exossomos isolados por ultracentrifugação do meio de cultura. A expressão gênica de let-7 desses exossomos foi analisada como acima descrito. Resultados Todos os microRNAs investigados foram expressos tanto na retina quanto no vítreo de neonatos, adultos e idosos, com relativo aumento da expressão no vítreo. Em todos os casos, os níveis de expressão foram mais elevados em animais adultos e idosos em comparação aos neonatos (de 3 a 5 vezes em média mais expressos), sugerindo sua modulação durante o envelhecimento. Além disso, let-7e mostrou maior expressão tanto na retina (média de 3,8 vezes maior) quanto no vítreo (média de 4,9 vezes maior), e let-7f, a menor. In vitro, as células gliais de Müller de rato e os exossomos isolados do meio de cultura também expressaram os microRNAs da família let-7.Conclusão Os microRNAs da família let-7 estão presentes no vítreo e na retina de ratos Wistar, sendo regulados positivamente durante o processo normal de envelhecimento. Nós sugerimos que as células de Müller podem ter uma função importante na produção e liberação desses microRNAs para o vítreo, especialmente let-7e, que pode estar envolvido na degradação de componentes da matriz vítrea.
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- Título do periódico: Resumos
- Conference titles: Reunião Anual da Federação de Sociedades de Biologia Experimental (FeSBE)
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ABNT
AKAMINE, P. S. et al. Expressão de microRNAs da familia let-7 no vítreo de ratos Wistar durante o envelhecimento. 2013, Anais.. Caxambu: FeSBE, 2013. . Acesso em: 28 mar. 2024. -
APA
Akamine, P. S., Del Debbio, C. B., Fuziwara, C. S., Kimura, E. T., & Hamassaki, D. E. (2013). Expressão de microRNAs da familia let-7 no vítreo de ratos Wistar durante o envelhecimento. In Resumos. Caxambu: FeSBE. -
NLM
Akamine PS, Del Debbio CB, Fuziwara CS, Kimura ET, Hamassaki DE. Expressão de microRNAs da familia let-7 no vítreo de ratos Wistar durante o envelhecimento. Resumos. 2013 ;[citado 2024 mar. 28 ] -
Vancouver
Akamine PS, Del Debbio CB, Fuziwara CS, Kimura ET, Hamassaki DE. Expressão de microRNAs da familia let-7 no vítreo de ratos Wistar durante o envelhecimento. Resumos. 2013 ;[citado 2024 mar. 28 ] - Expression of let-7 microRNA family in the aging rat retina and vitreous
- Células gliais de Müller interferem na expressão gênica de componentes da matriz vítrea
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