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Investigação da interação enzimática e das suas mudanças estruturais durante a hidrólise da biomassa lignocelulósica através de metodologias óticas (2012)

  • Authors:
  • USP affiliated authors: CONCEIÇÃO, FERNANDO RODRIGUES DA - ENG DE MATERIAI
  • USP Schools: ENG DE MATERIAI
  • Sigla do Departamento: FCM
  • Subjects: BIOMASSA; CELULOSE DE MADEIRA; ADSORÇÃO; HIDRÓLISE
  • Language: Português
  • Abstract: A investigação do processo de interação da enzima responsável pela hidrólise da biomassa lignocelulósica e das suas alterações estruturais são de suma importância no que diz respeito à otimização da produção do etanol de segunda geração proveniente da biomassa lignocelulósica. Neste contexto, metodologias óticas foram desenvolvidas e empregadas no presente trabalho na caracterização da interação enzimática com substrato celulósico. Basicamente, foram utilizadas espectroscopia de absorção Uv/vis, fluorescência e dicroísmo circular (CD). Fibras de eucalipto e celulose microcristalina (Avicel) foram usadas como substrato. Com o auxílio da fluorescência intrínseca da enzima Celobiohidrolase I de Thrichoderma harzianum (ThCBHI), foi possível desenvolver o método de arraste enzimático que nos permitiu determinar a dependência da interação enzima-substrato com o pH e a temperatura e estimar o número de enzimas adsorvidas na biomassa lignocelulósica. O efeito destes parâmetros sobre as estruturas secundárias da enzima ThCBHI e de sua influencia na interação enzimática também foi estudado. Medidas da seção choque efetiva de absorção demonstraram que a estrutura da ThCBHI sofreu grande influencia do pH e da temperatura, o que foi confirmado de forma complementar pela técnica de CD. Estimativas da fração de cobertura das enzimas na superfície do substrato indicam uma forte dependência da interação enzima-substrato com o pH e temperatura. Observou-se que essa interação é basicamente determinada pelas cargas efetivas acima e abaixo do ponto isoelétrico associado ao modulo de ligação à celulose, CBM. Além disso, o método colorimétrico Somogyi-Nelson (SN) permitiu quantificar com precisão pequenas quantidades de produto da hidrólise da biomassa pela enzima ThCBHI. Os resultados de atividade mostraram forte correlação entre o perfil de interaçãoe as mudanças estruturais sofridas pela enzima ThCBHI. Com essa metodologia foi possível estimar a máxima atividade da ThCBHI durante 24 horas de reação. Os valores do produto nos permitiu computar atividades específicas de 0,1 U/mg e 0,2 U/mg para 25°C e 50°C, respectivamente
  • Imprenta:
  • Data da defesa: 03.08.2012
  • Acesso online ao documento

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    BibliotecaCód. de barrasNúm. de chamada
    EESC31100195190TESE 8799
    How to cite
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    • ABNT

      CONCEIÇÃO, Fernando Rodrigues da; GUIMARÃES, Francisco Eduardo Gontijo. Investigação da interação enzimática e das suas mudanças estruturais durante a hidrólise da biomassa lignocelulósica através de metodologias óticas. 2012.Universidade de São Paulo, São Carlos, 2012. Disponível em: < http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/88/88131/tde-30072013-234905/pt-br.php >.
    • APA

      Conceição, F. R. da, & Guimarães, F. E. G. (2012). Investigação da interação enzimática e das suas mudanças estruturais durante a hidrólise da biomassa lignocelulósica através de metodologias óticas. Universidade de São Paulo, São Carlos. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/88/88131/tde-30072013-234905/pt-br.php
    • NLM

      Conceição FR da, Guimarães FEG. Investigação da interação enzimática e das suas mudanças estruturais durante a hidrólise da biomassa lignocelulósica através de metodologias óticas [Internet]. 2012 ;Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/88/88131/tde-30072013-234905/pt-br.php
    • Vancouver

      Conceição FR da, Guimarães FEG. Investigação da interação enzimática e das suas mudanças estruturais durante a hidrólise da biomassa lignocelulósica através de metodologias óticas [Internet]. 2012 ;Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/88/88131/tde-30072013-234905/pt-br.php

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