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Influência da insulina sobre a autofagia em modelo experimental de diabetes (2014)

  • Authors:
  • USP affiliated authors: SUNAHARA, KAREN KRIST SARY - FM
  • USP Schools: FM
  • Sigla do Departamento: MCM
  • Subjects: DIABETES MELLITUS; MACRÓFAGOS; MODELOS ANIMAIS; SISTEMA IMUNE; RATOS WISTAR
  • Keywords: Autofagia; Autophagy; Diabetes; Diabetes; Imunidade inata; Innate immunity; Insulin; Insulina; Macrófagos; Macrophages; Ratos Wistar; Wistar rats
  • Language: Português
  • Abstract: O diabetes mellitus (DM) é caracterizado por hiperglicemia associada à falta ou à ineficiência da insulina. DM também é marcado por alterações em diversos processos celulares que precisam ser mais bem entendidos. Estudou-se a via da autofagia em diferentes macrófagos, verificando se o tratamento com insulina é capaz de modular esse processo. Foram estudados macrófagos derivados da medula óssea (BMM), do lavado broncoalveolar (LBA) e do tecido esplênico de ratos Wistar, machos, diabéticos (aloxana, 42 mg/kg, i.v., 10 dias), ratos diabéticos tratados (insulina 4UI, s.c.) e respectivos controles. Para caracterização do modelo e avaliação do efeito da insulina sobre o processo autofágico, as seguintes análises foram realizadas: (a) glicemia, número de leucócitos no sangue periférico, número de células do LBA; (b) concentrações de citocinas: interleucina (IL)-1beta, fator de necrose tumoral (TNF)-alfa, IL-6, IL-4, IL-10, cytokine-induced neutrophil chemoattractant (CINC)-1 e CINC-2 no sobrenadante do LBA pela técnica de ELISA; (c) caracterização de macrófago alveolar (MA) do LBA quanto a antígenos de superfície (MHCII, pan-macrophage KiM2R, CD11b) e marcadores autofágicos (proteína de cadeia leve associada a microtúbulo (LC)3 , gene/proteína relacionado à autofagia (ATG) pela técnica de citometria de fluxo e microscopia confocal ; (d) estudo dos macrófagos diferenciados, a partir da medula óssea, por citometria de fluxo e microscopia confocal; (e) estudo da arquitetura do baço pela técnica de imuno-histoquímica associada à microscopia confocal. Avaliando os resultados em conjunto, a via autofágica parece ser de extrema importância e de capacidade inovadora para alvo terapêutico. Observou-se que a insulina exerceu efeitos antagônicos sobre os macrófagos de tecidos diferentes: aumentou a expressão LC3nos macrófagos recuperados por LBA e não conseguiu alterar a atividade autofágica em macrófagos da polpa vermelha do baço em ratos diabéticos. Os BMM originários de ratos diabéticos comportaram-se de maneira contrária aos do animal controle: os BMM tipo M1 tiveram o conteúdo de LC3 diminuído, enquanto os M2 tiveram o conteúdo autofágico aumentado. O tratamento com insulina nos ratos diabéticos não alterou o nível do conteúdo LC3 dos BMM, mesmo após uma semana de cultura in vitro. Concluímos, assim, que o tratamento com dose única de insulina foi capaz de induzir a autofagia em macrófagos alveolares, mas insuficiente para resgatar os níveis basais da autofagia em macrófagos da medula óssea e da polpa vermelha do baço
  • Imprenta:
  • Data da defesa: 11.08.2014

  • Exemplares físicos disponíveis nas Bibliotecas da USP
    BibliotecaCód. de barrasNúm. de chamada
    FM2649166-20W4.DB8. SP.USP FM-2 S954in 2014 Original
    How to cite
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    • ABNT

      SUNAHARA, Karen Krist Sary; SANNOMIYA, Paulina. Influência da insulina sobre a autofagia em modelo experimental de diabetes. 2014.Universidade de São Paulo, São Paulo, 2014.
    • APA

      Sunahara, K. K. S., & Sannomiya, P. (2014). Influência da insulina sobre a autofagia em modelo experimental de diabetes. Universidade de São Paulo, São Paulo.
    • NLM

      Sunahara KKS, Sannomiya P. Influência da insulina sobre a autofagia em modelo experimental de diabetes. 2014 ;
    • Vancouver

      Sunahara KKS, Sannomiya P. Influência da insulina sobre a autofagia em modelo experimental de diabetes. 2014 ;

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