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Expressão heteróloga de celulases por biblioteca metagenômica do solo da Caatinga (2015)

  • Authors:
  • USP affiliated authors: SÁBER, MÍRIAN LOBO - ESALQ
  • USP Schools: ESALQ
  • Subjects: ENZIMAS CELULOLÍTICAS; MICROBIOLOGIA DO SOLO; CAATINGA
  • Keywords: Metagenoma
  • Language: Português
  • Abstract: Os micro-organismos apresentam uma imensa diversidade genética e desempenham funções únicas e cruciais na manutenção de ecossistemas. Uma dessas funções é a produção de enzimas extracelulares, que ajudam na degradação da matéria orgânica e são cada vez mais procuradas e exploradas pela indústria. Essa propriedade aumenta a busca por enzimas que possam ser utilizadas nos diversos setores industriais com maior aproveitamento e baixo custo. A celulase pertence a essa classe de enzimas e é formada por um complexo multienzimático capaz de hidrolisar celulose por meio da quebra da ligação β,1-4. A partir dessa característica da celulase, foi realizada uma expressão heteróloga relacionada com a hidrólise da celulose em biblioteca metagenômica de solo da Caatinga. Foram realizados testes de produção enzimática por meio dos quais selecionamos os clones 283/A8 e 307/E11 como melhores produtores de endoglicanases. Com o objetivo de analisar a cinética de produção de celulases pelos clones, estes foram inoculados em diferentes fontes de celulose, pH e temperatura. A faixa ideal de pH foi 5,0 e de temperatura, 50º C, verificada para as enzimas Celulase Total, Endoglicanase e β-glicosidase. Quanto à termoestabilidade, as enzimas presentes mantiveram mais de 60% da atividade inicial após 2 horas de incubação a 50º C. O perfil de proteínas analisado por SDS-PAGE demonstrou que os clones secretam um conjunto de enzimas celulolíticas com 25 a 100 KDa, quando cultivado em farelo detrigo, e 30 a 60 KDa, quando cultivados em CMC. No ensaio de cromatografia para o clone 307/E11, foram selecionadas 5 frações que obtiveram melhores resultados na dosagem enzimática e testados frente ao pH e à temperatura. O resultado obtido foi que o complexo enzimático bruto, extraído do sobrenadante produzido pelo clone, possui melhor atividade frente ao pH e à temperatura do que as frações parcialmente purificadas
  • Imprenta:
  • Data da defesa: 23.02.2015
  • Acesso online ao documento

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    BibliotecaCód. de barrasNúm. de chamada
    ESABC12700011590t631.46 S115e e.1 108563
    How to cite
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    • ABNT

      SÁBER, Mírian Lobo; MELO, Itamar Soares de. Expressão heteróloga de celulases por biblioteca metagenômica do solo da Caatinga. 2015.Universidade de São Paulo, Piracicaba, 2015. Disponível em: < http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/11/11138/tde-29042015-111639/ >.
    • APA

      Sáber, M. L., & Melo, I. S. de. (2015). Expressão heteróloga de celulases por biblioteca metagenômica do solo da Caatinga. Universidade de São Paulo, Piracicaba. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/11/11138/tde-29042015-111639/
    • NLM

      Sáber ML, Melo IS de. Expressão heteróloga de celulases por biblioteca metagenômica do solo da Caatinga [Internet]. 2015 ;Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/11/11138/tde-29042015-111639/
    • Vancouver

      Sáber ML, Melo IS de. Expressão heteróloga de celulases por biblioteca metagenômica do solo da Caatinga [Internet]. 2015 ;Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/11/11138/tde-29042015-111639/

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