Investigação dos mecanismos biológicos de detoxificação de aldeídos α,β- insaturados em ratos SO´DPOT.G93A´ modelo para ALS (2015)
- Authors:
- Autor USP: BISPO, VANDERSON DA SILVA - IQ
- Unidade: IQ
- Sigla do Departamento: QBQ
- Subjects: RADICAIS LIVRES; ESTRESSE OXIDATIVO; METABÓLITOS SECUNDÁRIOS; URINA (ANÁLISE)
- Language: Português
- Abstract: A lipoperoxidação gera diversas espécies carbonílicas altamente reativas dentre as quais se destacam acroleína (ACR), malondialdeído (MDA), 4-hidroxi-2-hexenal (HHE) e 4-hidroxi-2-nonenal (HNE). A principal via endógena de metabolização desses compostos é através de conjugação com glutationa por ação da glutationa-S-tranferase. Contudo, diversos trabalhos têm mostrado que dipeptídeos contendo histidina, tal como a carnosina (CAR), também podem formar conjugados com aldeídos e auxiliar na detoxificação desses compostos. Em nosso trabalho adutos de CAR com ACR, HHE, HH´EdIND.5´, HNE e HN´EdIND.11´ foram sintetizados, purificados e caracterizados. A reação da CAR com ACR foi estudada em detalhes. Resultados mostraram que a carnosina reage com acroleína formando 03 produtos principais: m/z = 265, m/z = 283 e m/z = 303, sendo este último mais estável e mais abundante. Dados de RMN ´HPOT.1´, COSY e HSQC permitiram elucidar a estrutura dessa molécula (m/z = 303) e propor uma rota de reação. Em seguida, uma metodologia baseada em cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas do tipo "Ion Trap" (E´SIPOT.+´ HPLC/MS-MS) foi desenvolvida e validada para quantificação simultânea dos adutos sintetizados. Pelo método desenvolvido é possível quantificar com precisão 25 pmol de CAR-HHE, 1 pmol de CAR-ACR e 1 pmol de CAR-HNE com um coeficiente de variação de aproximadamente 10 % e acurácia de 98 % (HHEd5 e HNEd'' foram usados como padrão interno). Análise em urina de adultos não fumantes mostraram que os produtos sintetizados estão presentes na urina de humanos em concentrações de 3,6 ± 1,4; 2,3 ± 1,5 e 1,3 ± 0,5 nmol / mg de creatinina, respectivamente para CAR-ACR, CAR-HHE e CAR-HNE. Em ratos transgênicos SO´DPOT.G93A´ modelo para esclerose lateral amiotrófica (ELA), a suplementação da dieta dos animais com 35 ± 5 mg carnosina/animal/semana melhorou amanutenção do peso e a sobrevida dos animais. Análises dos adutos sintetizados em amostras de músculo sugerem que a metabolização de aldeídos esteja comprometida nesses animais e que a carnosina poderia funcionar como "scavenger" para esses compostos. Esses resultados comprovam que dipeptídeos de histidina atuam na detoxificação de compostos carbonílicos e participa de suas vias de excreção. Além disso, a caracterização da estrutura e desenvolvimento de método sensível de detecção abre a possibilidade de utilização desses adutos como biomarcadores de estresse redox e exposição a aldeídos
- Imprenta:
- Data da defesa: 15.09.2015
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ABNT
BISPO, Vanderson da Silva. Investigação dos mecanismos biológicos de detoxificação de aldeídos α,β- insaturados em ratos SO´DPOT.G93A´ modelo para ALS. 2015. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2015. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-07122015-105825/. Acesso em: 19 abr. 2024. -
APA
Bispo, V. da S. (2015). Investigação dos mecanismos biológicos de detoxificação de aldeídos α,β- insaturados em ratos SO´DPOT.G93A´ modelo para ALS (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-07122015-105825/ -
NLM
Bispo V da S. Investigação dos mecanismos biológicos de detoxificação de aldeídos α,β- insaturados em ratos SO´DPOT.G93A´ modelo para ALS [Internet]. 2015 ;[citado 2024 abr. 19 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-07122015-105825/ -
Vancouver
Bispo V da S. Investigação dos mecanismos biológicos de detoxificação de aldeídos α,β- insaturados em ratos SO´DPOT.G93A´ modelo para ALS [Internet]. 2015 ;[citado 2024 abr. 19 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/46/46131/tde-07122015-105825/
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