Sistema de expressão induzido por estradiol em Saccharomyces cerevisiae (2016)
- Authors:
- Autor USP: ADRIANI, PATRICIA PEREIRA - BIOTECNOLOGIA
- Unidade: BIOTECNOLOGIA
- Sigla do Departamento: a Nome do Programa Interunidades no site do Instituto de Ciências Biomédicas da Universidade de São Paulo
- Subjects: SACHAROMYCES; LEVEDURAS; ESTRÓGENOS; TRICHODERMA; ESTRADIOL
- Keywords: Saccharomyces cerevisiae; Saccharomyces cerevisiae; Trichoderma ressei; Estrogen; Estrogênio; Expression system; Levedura; Promoter; Promotor; Protein; Proteína; Sistema de expressão; Trichoderma reesei; Yeast
- Language: Português
- Abstract: Devido as suas características funcionais, as proteínas vêm sendo cada vez mais utilizadas em diferentes áreas e atividades da sociedade humana como: alimentícia, indústria, têxtil, papel e celulose, química e médica. A produção industrial de proteínas de valor comercial para diversas aplicações, vem sendo cada vez mais conduzida através do desenvolvimento de sistemas de expressão em diferentes hospedeiros, como Saccharomyces cerevisiae. O presente trabalho teve por objetivo desenhar um sistema de expressão metabolicamente independente induzido pelo hormônio estradiol que, em S. cerevisiae, seja capaz de produzir e secretar com eficiência proteínas homólogas e/ou heterólogas de interesse industrial. Para tanto, foi desenhado e construído um plasmídeo regulador (que expressa o fator de transcrição quimérico c-mycGal4(DBD)hERα(LBD)VP16(AD) e um plasmídeo de expressão (que contém o promotor quimérico p5xUASGAL-UARcb1, o qual será induzido pelo fator de transcrição quimérico, regulando a expressão da proteína repórter celobiohidrolase I - cbh1 de Trichoderma reesei). Ambos plasmídeos foram utilizados para transformar a cepa ScW303-1A/pdr5Δ(construída neste trabalho) e induzido com diferentes concentrações de estradiol. Para analisar a habilidade do promotor em dirigir a expressão da proteína repórter cbh1, foi feito o teste de DNS, com os transformantes selecionados, utilizando carboximetilcelulose 1% como substrato.A maior atividade enzimática ocorre na indução do sistema com 5 μM de 17-β-estradiol e DES (dietilestilbestrol). Os resultados mostram que o sistema de expressão induzido por 17-β-estradiol e DES, funciona de forma eficiente em S. cerevisiae e que o mesmo pode ser utilizado na produção biotecnológica de outras proteínas de interêsse
- Imprenta:
- Data da defesa: 03.05.2016
-
ABNT
ADRIANI, Patricia Pereira. Sistema de expressão induzido por estradiol em Saccharomyces cerevisiae. 2016. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2016. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-23082016-091835/. Acesso em: 24 abr. 2024. -
APA
Adriani, P. P. (2016). Sistema de expressão induzido por estradiol em Saccharomyces cerevisiae (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-23082016-091835/ -
NLM
Adriani PP. Sistema de expressão induzido por estradiol em Saccharomyces cerevisiae [Internet]. 2016 ;[citado 2024 abr. 24 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-23082016-091835/ -
Vancouver
Adriani PP. Sistema de expressão induzido por estradiol em Saccharomyces cerevisiae [Internet]. 2016 ;[citado 2024 abr. 24 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-23082016-091835/ - Desenho e avaliação de um sistema enzimático recombinante para proteção in vitro de células epidérmicas humanas HaCaT ao estresse oxidativo
- Estudo e caracterização das enzimas Catalase e Glutationa Peroxidase de Trichoderma reesei
- Structural and functional characterization of the glutathione peroxidase-like thioredoxin peroxidase from the fungus Trichoderma reesei
- Delivery of superoxide dismutase by TAT and abalonepeptides for the protection of skin cells against oxidativestress
How to cite
A citação é gerada automaticamente e pode não estar totalmente de acordo com as normas