Identificação dos determinantes estruturais de Fe/MnSODs necessários a especificidade por metal (2016)
- Authors:
- Autor USP: FONTOLAN, LAUREANA STELMASTCHUK BENASSI - BIOTECNOLOGIA
- Unidade: BIOTECNOLOGIA
- Subjects: SUPERÓXIDO DISMUTASE; METAIS (ESPECIFICAÇÃO); TRICHODERMA; ENZIMAS OXIRREDUTORAS; TRYPANOSOMATIDAE
- Keywords: Trichoderma reesei; Trichoderma reesei; Trypanosoma brucei; Trypanosoma brucei; Análise de acoplamento estatístico; Especificidade por metal; Metal specificity; Statistical coupling analysis; Superoxide dismutase; Superóxido dismutase
- Language: Português
- Abstract: Superóxido dismutases (SODs) são metaloenzimas que convertem o ânion superóxido em oxigênio molecular (O2) e peróxido de hidrogênio (H2O2). A presença de metal nessas enzimas está diretamente relacionada com seus mecanismos de catálise e com suas estruturas tridimensionais. Evolucionariamente, FeSOD e MnSOD podem ter evoluído de um gene ancestral comum, porque possuem sequências homólogas e estruturas cristalográficas sobreponíveis. Entretanto, a nível catalítico, ambas as proteínas divergiram o suficiente para que seus metais não possam ser intercambiáveis, produzindo uma enzima funcional, indicando que essas proteínas possuem alta especificidade por metal. O objetivo deste projeto de pesquisa é Identificar os determinantes estruturais do ajuste fino da especificidade por metal de MnSOD e FeSOD. Inicialmente, pretendese selecionar resíduos para mutagênese sítio-dirigida em TrMnSOD e TbFeSODB2, a partir de análise de acoplamento estatístico (SCA). Em seguida, mutantes serão construídos, expressos, purificados e cristalizados. A estrutura tridimensional dos mutantes será resolvida por cristalografia e sua atividade enzimática determinada, bem como a acomodação estrutural dos metais por Resonância Paramagnética Eletrônica. Nossa hipótese de trabalho é que através de SCA é possível elencar resíduos de aminoácidos candidatos para mutagênese sítio-dirigida para desenhar novas SODs, com características intermediárias de ligação por Fe/Mn, como possibilidade de interconversão deespecificidade, caminhando na história evolutiva dessas moléculas
- Imprenta:
- Data da defesa: 18.01.2016
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ABNT
FONTOLAN, Laureana Stelmastchuk Benassi. Identificação dos determinantes estruturais de Fe/MnSODs necessários a especificidade por metal. 2016. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2016. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-25082016-105547/. Acesso em: 29 mar. 2024. -
APA
Fontolan, L. S. B. (2016). Identificação dos determinantes estruturais de Fe/MnSODs necessários a especificidade por metal (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-25082016-105547/ -
NLM
Fontolan LSB. Identificação dos determinantes estruturais de Fe/MnSODs necessários a especificidade por metal [Internet]. 2016 ;[citado 2024 mar. 29 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-25082016-105547/ -
Vancouver
Fontolan LSB. Identificação dos determinantes estruturais de Fe/MnSODs necessários a especificidade por metal [Internet]. 2016 ;[citado 2024 mar. 29 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/87/87131/tde-25082016-105547/ - A high throughput, inexpensive and open-source biorreactor for optimization of recombinant protein expression
- A high throughput, inexpensive and open-source biorreactor for optimization of recombinant protein expression
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- Unexpected plasticity of the quaternary structure of iron-manganese superoxide dismutases
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