Papel do gene CG2943 (EMC1) durante o desenvolvimento da asa de Drosophila melanogaster (2017)
- Authors:
- Autor USP: OLIVEIRA, RAFAEL MONTEIRO DE - FMRP
- Unidade: FMRP
- Sigla do Departamento: RBP
- Subjects: DROSOPHILA; BIOLOGIA CELULAR; BIOLOGIA MOLECULAR; FENÓTIPOS
- Language: Português
- Abstract: A proteína EMC1 (Homo sapiens) é parte constituinte do complexo EMC. Dados da literatura sugerem que este complexo seja residente do retículo endoplasmático e esteja relacionado ao correto dobramento de proteínas de membrana, transporte de lipídios entre retículo endoplasmático e mitocôndrias e a mecanismos de resposta ao estresse (UPR/ERAD). É um complexo altamente conservado evolutivamente, estando presente em todos os eucariotos. Em Drosophila melanogaster, o gene CG2943, localizado no cromossomo 3R (posição 84E4-84E5) codifica uma proteína ortóloga de EMC1. Neste trabalho, visamos analisar os efeitos decorrentes da perda e ganho de função deste gene, na busca de melhor compreender o seu papel no desenvolvimento animal. Por meio do sistema modular UAS-GAL4, foi direcionado um RNAi contra CG2943 no disco imaginal de asa, estrutura responsável pela formação da asa de D. melanogaster. Como consequência deste silenciamento, observamos fêmeas com as asas curvadas ao nascer e que, dois dias após o nascimento, passavam a exibir severas deteriorações nas bordas, resultando na incapacidade para o voo. Realizamos ensaios de imunohistoquímica indireta, onde foi demonstrada a colocalização de EMC1 com calreticulina, confirmando assim os dados da literatura sobre a EMC1 ser residente do retículo endoplasmático. Por meio de RT qPCR foram investigados os níveis de transcrição de Notch, um receptor de membrana responsável pela sinalização que ocorre na borda das asas durante sua formação, além de Delta e Serrate (seus ligantes), com isto observamos uma redução significativa na expressão de Delta quando CG2943 está silenciado. Contudo, a expressão exógena do domínio intracelular de Notch, dirigida para o disco de asa enquanto EMC1 estava silenciada não foi capaz de recuperar o fenótipo decorrente do silenciamento. A redução da expresão de CG2943 também resultou em aumentossignificativos na transcrição de Perk e Ire1, dois dos três genes sensores de estresse do retículo endoplasmático, decorrente do mal enovelamento de proteínas (UPR), o que é consistente com a literatura sobre a participação de EMC1 neste processo. A superexpressão de CG2943, também dirigida para o disco imaginal de asa, não apresentou alterações fenotípicas drásticas, mas foi capaz de recuperar o fenótipo decorrente do silenciamento. Concluímos que EMC1 tem função importante para o correio desenvolvimento da asa de D. melanogaster, porém seu papel exato neste contexto ainda requer mais estudos para ser elucidado
- Imprenta:
- Publisher place: Ribeirão Preto
- Date published: 2017
- Data da defesa: 13.11.2017
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ABNT
OLIVEIRA, Rafael Monteiro de. Papel do gene CG2943 (EMC1) durante o desenvolvimento da asa de Drosophila melanogaster. 2017. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2017. . Acesso em: 24 abr. 2024. -
APA
Oliveira, R. M. de. (2017). Papel do gene CG2943 (EMC1) durante o desenvolvimento da asa de Drosophila melanogaster (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. -
NLM
Oliveira RM de. Papel do gene CG2943 (EMC1) durante o desenvolvimento da asa de Drosophila melanogaster. 2017 ;[citado 2024 abr. 24 ] -
Vancouver
Oliveira RM de. Papel do gene CG2943 (EMC1) durante o desenvolvimento da asa de Drosophila melanogaster. 2017 ;[citado 2024 abr. 24 ]
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