Identificação, clonagem e expressão de proteínas secretadas de Rhodosporidium fluviale cultivada em lignina (2018)
- Authors:
- Autor USP: FERREIRA, MARIANA DIAS - FFCLRP
- Unidade: FFCLRP
- Sigla do Departamento: 593
- Subjects: LIGNINA; BIOMASSA; CELULOSE; BIOCOMBUSTÍVEIS; LEVEDURAS
- Language: Português
- Abstract: A biomassa lignocelulósica é composta principalmente de celulose, hemicelulose e lignina e, por ser uma promissora fonte de carboidratos mistos, tem grande potencial como matéria-prima para biocombustíveis de segunda geração. A lignina protege o domínio celulose-hemicelulose resultando em uma estrutura recalcitraste característica da biomassa lignocelulósica da parede celular do bagaço de cana-de-açúcar e de outros materiais vegetais. Com a finalidade de melhorar o processamento da biomassa lignocelulósica de matérias-primas, métodos mais eficazes de degradação de lignina têm sido estudados. Assim, o objetivo desse trabalho foi identificar proteínas secretadas pela levedura Rhodosporidium fluviale, isolada de bagaços de cana-de-açúcar em decomposição, e produzir proteínas recombinantes envolvidas com degradação de biomassa. O crescimento da levedura em diferentes fontes de carbono como glicose, xilose, bagaço de cana-de-açúcar e lignina foi caracterizado. O filtrado extracelular da cultura em lignina foi aplicado em gel desnaturante de poliacrilamida e as bandas proteicas foram analisadas por espectrometria de massas. Foram identificadas 14 proteínas e uma carboidrato esterase, uma endoglucanase e uma xilitol desidrogenase foram selecionadas para clonagem por extensão circular da polimerase (CPEC). As construções em vetor pET28a foram utilizadas para a expressão das proteínas em E.coli. As proteínas carboidrato esterase e endoglucanase foram expressas como corpo de inclusão e, após renovelamento proteico, foram parcialmente purificadas por cromatografia de afinidade. Os resultados indicam que a levedura R. fluviale é uma possível fonte de enzimas para degradação da lignina e sugerem um potencial biotecnológico desta levedura e suas enzimas para desenvolvimento de estratégias para o processamento de biomassa lignocelulósica
- Imprenta:
- Publisher place: Ribeirão Preto
- Date published: 2018
- Data da defesa: 23.02.2018
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ABNT
FERREIRA, Mariana Dias. Identificação, clonagem e expressão de proteínas secretadas de Rhodosporidium fluviale cultivada em lignina. 2018. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2018. . Acesso em: 18 abr. 2024. -
APA
Ferreira, M. D. (2018). Identificação, clonagem e expressão de proteínas secretadas de Rhodosporidium fluviale cultivada em lignina (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. -
NLM
Ferreira MD. Identificação, clonagem e expressão de proteínas secretadas de Rhodosporidium fluviale cultivada em lignina. 2018 ;[citado 2024 abr. 18 ] -
Vancouver
Ferreira MD. Identificação, clonagem e expressão de proteínas secretadas de Rhodosporidium fluviale cultivada em lignina. 2018 ;[citado 2024 abr. 18 ]
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