Análise proteômica de saliva em pacientes com câncer de cabeça e pescoço: padronização de protocolo de extração (2017)
- Authors:
- USP affiliated authors: SANTOS, PAULO SERGIO DA SILVA - FOB ; BUZALAF, MARILIA AFONSO RABELO - FOB
- Unidade: FOB
- Subjects: PROTEÔMICA; SALIVA; NEOPLASIAS DE CABEÇA E PESCOÇO
- Language: Português
- Abstract: Objetivos: padronizar o protocolo para extração proteica de saliva para avaliação do perfil proteômico deste fluido em pacientes oncológicos diagnosticados com câncer de cabeça e pescoço. Métodos e Procedimentos: dez participantes fizeram parte da pesquisa, onde as salivas foram coletadas por fluxo não estimulado. Para a realização dos protocolos, os experimentos foram divididos em dois momentos, a saber: o primeiro teste foi realizado para a comparação da utilização ou não da coluna de depleção de albumina e IgG. Já o segundo teste foi realizado para análise de pools de dez amostras de saliva ou análise individual. As proteínas das amostras de salivas foram extraídas com uma solução de 6M de Ureia, 2M de Thiourea em 50 mM de Bicarbonato de Amônia. Após a extração, as amostras foram concentradas, reduzidas com 10mM de DTT, alquiladas com 5mM de Iodoacetamida e digeridas com Tripsina a 37°C por 14h. Após este período, as amostras foram purificadas e realizada a quantificação proteica pelo método de Bradford. As amostras foram então submetidas para identificação no Espectrômetro de Massas (Xevo G2 Waters). Resultados: a partir dos resultados encontrados no primeiro teste, foi possível observar não é necessário utilizar a coluna de depleção de albumina e IgG, pois quando esta não foi utilizada foram identificadas 520 proteínas, ao passo que apenas 35 foram identificadas quando da utilização da coluna. Em relação ao segundo teste, quando foi confeccionado o pool de dez salivas foram identificadas 422 proteínas. Já para a análise individual, foram identificadas 514 proteínas. Em ambos os casos foram identificadas proteínas típicas da salivaConclusões: concluímos que a padronização do protocolo para análise proteômica de saliva foi satisfatória, uma vez que a identificação detectou proteínas já descritas como típicas na saliva, além de identificar outras proteínas, resultando em um número maior de proteínas encontradas quando comparado com outros trabalhos presentes na literatura sobre análises proteômicas de saliva. Os resultados indicam que não é necessário utilizar a coluna de depleção de albumina e IgG e que é possível fazer análise de amostras individuais
- Imprenta:
- Publisher: Universidade de São Paulo
- Publisher place: São Paulo
- Date published: 2017
- Source:
- Título do periódico: Resumos
- Conference titles: Simpósio Internacional de Iniciação Científica da Universidade de São Paulo - SIICUSP
-
ABNT
RIBEIRO, Nathalia Regina et al. Análise proteômica de saliva em pacientes com câncer de cabeça e pescoço: padronização de protocolo de extração. 2017, Anais.. São Paulo: Universidade de São Paulo, 2017. . Acesso em: 23 abr. 2024. -
APA
Ribeiro, N. R., Ventura, T. M. da S., Santos, P. S. da S., & Buzalaf, M. A. R. (2017). Análise proteômica de saliva em pacientes com câncer de cabeça e pescoço: padronização de protocolo de extração. In Resumos. São Paulo: Universidade de São Paulo. -
NLM
Ribeiro NR, Ventura TM da S, Santos PS da S, Buzalaf MAR. Análise proteômica de saliva em pacientes com câncer de cabeça e pescoço: padronização de protocolo de extração. Resumos. 2017 ;[citado 2024 abr. 23 ] -
Vancouver
Ribeiro NR, Ventura TM da S, Santos PS da S, Buzalaf MAR. Análise proteômica de saliva em pacientes com câncer de cabeça e pescoço: padronização de protocolo de extração. Resumos. 2017 ;[citado 2024 abr. 23 ] - Saliva: impacto na saúde bucal e uso no diagnóstico de condições bucais e sistêmicas
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