Efeitos da hipertensão e do treinamento aeróbio sobre a expressão/atividade de diferentes componentes da barreira hematoencefálica (2018)
- Authors:
- Autor USP: FRAGAS, MATHEUS GARCIA DE - ICB
- Unidade: ICB
- Sigla do Departamento: BMB
- Subjects: EXPRESSÃO GÊNICA; TREINAMENTO AERÓBIO; HIPERTENSÃO; BARREIRA HEMATO-ENCEFÁLICA; RATOS
- Keywords: ratos espontaneamente hipertensos; barreira hematoencefálica; treinamento aeróbio; hipotálamo;; spontaneously hypertensive rats; blood-brain barrier aerobic training; hypothalamus;
- Language: Português
- Abstract: A hipertensão arterial cursa com disfunção autonômica e lesão da barreira hematoencefálica (BHE) em áreas de controle autonômico. Demonstramos recentemente que o treinamento aeróbio corrige a lesão da BHE, e a disfunção autonômica, a qual se encontra correlacionada com a integridade da BHE observada nos hipertensos treinados. O objetivo deste trabalho é avaliar a expressão gênica e proteica de componentes da BHE envolvidos na mediação das respostas cardiovasculares à hipertensão e ao treinamento aeróbio (T). Ratos espontaneamente hipertensos (SHR) e seus controles normotensos (WKY) (250-300g) foram submetidos ao protocolo de T em esteira ou mantido sedentários (S) por 4 semanas. Ao final do T os animais dos grupos experimentais foram canulados para aquisição das variáveis hemodinâmicas. A seguir procedeu-se à infusão intra-arterial de 2 corantes (Rodamina-d, 70 KD, e FITC-d,10 KD) e 20 min após os encéfalos foram coletados para realização de ensaios de fluorescência no Núcleo Paraventricular do Hipotálamo (PVN). Outros ratos dos grupos experimentais foram perfundidos com salina via transcardíaca e realizada a microdissecção do PVN. O mRNA foi extraído e sua concentração de foi analisada pela técnica de RT-PCR. Para investigar os efeitos da hipertensão e do T nos componentes da BHE, foram utilizados os seguintes primers: Occludina, Claudina-5, Zônula Ocludens 1 (proteínas da junção oclusiva), Caveolina-1 (indicador de transporte transcelular), Laminina alfa 1 e Colágeno 4 (componentes da membrana basal), PDGFRβ (marcador de pericitos)e Aquaporina-4 (indicador de podócitos de astrócitos), todos eles normalizados para o HPRT endógeno.Os dados de PCR em tempo real foram quantificados pelo método 2Δ ΔCT. Além disso, outros ratos dos mesmos grupos experimentais foram perfundidos com paraformaldeído 4% para a fixação do encéfalo. O tecido foi crioprotegido e seccionado em criostato, 30 um, os cortes foram incubados em anticorpos primários (Reca-1(marcador endotelial), Claudina-5, Caveolina-1, PDGFRβ e Aquaporina-4) e secundários (Alexa Flúor 488 e 594), e sua quantificação no PVN foi realizada através da densidade integrada. Não foi observada diferença na pressão arterial entre os grupos T e S, porém, houve bradicardia de repouso nos animais T (SHR-T:317±3 e WKY-T:308±2) comparados com os animais S (SHR-S: 344±4 e WKY-S: 323±3). A permeabilidade da BHE foi reduzida e normalizada pelo T nos animais hipertensos (SHR-S: 13,6±1,2% e SHR-T: 3,8±0,4%; WKY-S: 3,9±0,2% e WKY-T: 4,1±0,16%), e análise do RT-PCR não mostrou nenhuma diferença para Claudina, PDGFRβ e Aquaporina-4 entre os T e S. A expressão gênica de Caveolina-1 estava aumentada nos SHR comparado aos WKY, e o T foi capaz de reduzir sua expressão (SHR-T: 1,05±0,1). O que foi confirmado pela expressão proteica no PVN: a Caveolina-1 encontrava-se aumentada significativamente nos SHR-S em relação aos WKY, e o T reduziu sua expressão no PVN dos SHR.Conclusão: Nossos dados sugerem que o aumento da permeabilidade da BHE no PVN de hipertensos é devida ao aumento de transcitose, identificada pela expressão de Caveolina-1 e que o treinamento aeróbio reverte esta permeabilidade ao reduzir o transporte transcelular sem alterar o transporte paracelular
- Imprenta:
- Data da defesa: 29.06.2018
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ABNT
FRAGAS, Matheus Garcia. Efeitos da hipertensão e do treinamento aeróbio sobre a expressão/atividade de diferentes componentes da barreira hematoencefálica. 2018. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2018. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42137/tde-22032019-113127/. Acesso em: 23 abr. 2024. -
APA
Fragas, M. G. (2018). Efeitos da hipertensão e do treinamento aeróbio sobre a expressão/atividade de diferentes componentes da barreira hematoencefálica (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42137/tde-22032019-113127/ -
NLM
Fragas MG. Efeitos da hipertensão e do treinamento aeróbio sobre a expressão/atividade de diferentes componentes da barreira hematoencefálica [Internet]. 2018 ;[citado 2024 abr. 23 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42137/tde-22032019-113127/ -
Vancouver
Fragas MG. Efeitos da hipertensão e do treinamento aeróbio sobre a expressão/atividade de diferentes componentes da barreira hematoencefálica [Internet]. 2018 ;[citado 2024 abr. 23 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42137/tde-22032019-113127/ - Investigando o papel da ativação dos inflamassomas NLRP1 e CARD8 em modelos de doenças neurodegenerativas
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