Efeitos da inibição da proteína PTEN sobre a neuroinflamação em células gliais (2018)
- Authors:
- Autor USP: PAIXÃO, AMANDA GALVÃO DA - ICB
- Unidade: ICB
- Sigla do Departamento: BMF
- Subjects: ENZIMAS HIDROLÍTICAS; ATIVAÇÃO ENZIMÁTICA; PLASMÍDEOS; CITOCINAS; ANTIOXIDANTES; REAÇÃO EM CADEIA POR POLIMERASE; IMUNOFLUORESCÊNCIA; ELISA; WESTERN BLOTTING
- Keywords: Células gliais; Compartimentalização; Compartimentalization; Glial cells; Neuroinflamação; Neuroinflammation; PTEN; PTEN
- Language: Português
- Abstract: Outrora proposta exclusivamente como fosfatase citoplasmática, hoje sabe-se que as funções da PTEN vão além de sua atividade de fosfatase e podem depender de sua localização na célula. Evidências crescentes apontam para o potencial papel da PTEN sobre a inflamação. Este trabalho objetivou investigar os efeitos modulatórios da PTEN sobre a neuroinflamação e o papel de sua compartimentalização (núcleo/citoplasma) em células gliais. Células gliais primárias de rato foram co-tratadas com BpV(pic) e LPS por períodos de 4 h e 24 h. Células U87MG (PTENnull) foram desafiadas com LPS e transfectadas com os plasmídeos para localização subcelular da PTEN. Os efeitos foram avaliados por ensaios de viabilidade celular, Western Blotting, imunofluorescência, qRT-PCR, ELISA e Multiplex. A eficiência de inibição da PTEN pelo BpV(pic) foi confirmada pela maior fosforilação da AKT. Em 24 h de co-tratamento com BpV(pic), houve redução da resposta ao LPS para as citocinas IL-1b e TNF-a tanto a nível de RNAm quanto proteico, bem como indução da enzima Arginase-1 e atenuação da expressão do receptor CD206. Ainda em 24 h, houve indução da expressão das enzimas antioxidantes Sod2 e Gsr nas células co-tratadas com BpV(pic) e LPS. Em 4h de co- tratamento, a inibição da PTEN por si só induziu a secreção da citocina IL-6. Tanto o BpV(pic) exclusivamente quanto o co-tratamento com LPS não interferiu com a sinalização de IL-10 nem com os níveis de NO. Interessantemente, o desafio com LPS em células U87MGInteressantemente, o desafio com LPS em células U87MG (PTENnull) não induziu resposta via translocação de p65 ou secreção de TNF-a, mas reduziu a viabilidade celular em altas doses (100 mg/mL). A transfecção das células com plasmídeos para localização subcelular da PTEN sugere que a linhagem U87MG parece não ser facilmente transfectável pelos métodos avaliados. A inibição farmacológica da PTEN mostrou-se um interessante alvo à reversão da resposta glial ao LPS. A continuidade deste estudo com outros esquemas de tratamento com BpV(pic) e utilizando-se um modelo de células PTENnull mais facilmente transfectável pode levar a uma melhor interpretação dos dados obtidos até o momento
- Imprenta:
- Data da defesa: 09.11.2018
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ABNT
PAIXÃO, Amanda Galvão da. Efeitos da inibição da proteína PTEN sobre a neuroinflamação em células gliais. 2018. Dissertação (Mestrado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2018. Disponível em: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42136/tde-08102019-160812/. Acesso em: 23 abr. 2024. -
APA
Paixão, A. G. da. (2018). Efeitos da inibição da proteína PTEN sobre a neuroinflamação em células gliais (Dissertação (Mestrado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42136/tde-08102019-160812/ -
NLM
Paixão AG da. Efeitos da inibição da proteína PTEN sobre a neuroinflamação em células gliais [Internet]. 2018 ;[citado 2024 abr. 23 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42136/tde-08102019-160812/ -
Vancouver
Paixão AG da. Efeitos da inibição da proteína PTEN sobre a neuroinflamação em células gliais [Internet]. 2018 ;[citado 2024 abr. 23 ] Available from: http://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42136/tde-08102019-160812/
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