Interação da serino protease SepA de Escherichia coli enteroagregativa com células epiteliais in vitro (2019)
- Authors:
- Autor USP: ANDRADE, FERNANDA BATISTA DE - ICB
- Unidade: ICB
- Sigla do Departamento: BMB
- Subjects: MICROBIOLOGIA; ESCHERICHIA COLI; CÉLULAS EPITELIAIS; ENTEROTOXINAS; CITOTOXINAS; INTERLEUCINAS; MUCOSA INTESTINAL; SHIGELLA; ACTINAS
- Keywords: Escherichia coli; Escherichia coli; Células epiteliais; Citotoxina; Cytotoxin; Epithelial cells; Proteinases; Proteinases; Shigella; Shigella
- Language: Português
- Abstract: Escherichia coli enteroagregativa (EAEC) é definida como o patótipo de E. coli diarreiogênica que apresenta o padrão de adesão agregativo em células epiteliais. Após a colonização na mucosa intestinal, EAEC secreta diversas enterotoxinas e citotoxinas, dentre elas as proteínas denominadas serino proteases autotransportadoras de Enterobacteriaceae (SPATEs), classificadas em classe-1 (citotóxicas) e classe-2 (imunomoduladoras). SepA (Shigella extracelular protein A) é uma SPATE de 110 kDa de classe-2, que foi originalmente descrita em Shigella flexneri 5a e posteriormente em EAEC. A presença do gene sepA é um marcador associado à diarreia causada por EAEC, indicando que esta toxina tem um importante papel na sua patogênese. Entretanto, estudos caracterizando SepA como fator de virulência são restritos a S. flexneri. Nessa espécie, SepA participa da destruição e invasão do tecido epitelial, mas não apresenta efeito citotóxico em células HEp-2. No entanto, desestabiliza a integridade das junções oclusivas em células T84 polarizadas, através da ativação da cofilina. Sendo assim, o presente estudo teve como objetivos avaliar a prevalência de sepA em uma coleção de EAEC isolada no Brasil, purificar SepA e analisar sua interação com as linhagens Caco-2, HEp-2, HeLa, HT-29, MDCK, Vero e Y-1, bem como a sua capacidade de induzir interleucinas em células HT-29. O gene sepA foi detectado em 13,5% das 193 cepas de EAEC e foi significativamente associado ao subgrupo de EAEC atípicas.SepA foi purificada em sua forma nativa a partir da cepa de S. flexneri 5a M90T, mostrando atividade biológica de serino protease. SepA causou alterações morfológicas nas células HeLa e HT-29, induzidas pela sua ligação à membrana dessas células, sem que ocorresse internalização. Os mesmos efeitos foram causados pela interação da cepa de EAEC produtora de SepA (BA732::pic) e a secreção dessa SPATE foi observada no foco de adesão das bactérias às células epiteliais. As alterações morfológicas em HeLa e HT-29 não levou à morte celular. SepA também foi capaz de induzir a produção de IL-8 nas células HT-29. Nossos dados indicam que, tal como em Shigella, SepA é um importante fator de virulência de EAEC, uma vez que induz efeito citopático e pró-inflamatório em células de origem intestinal humana, alterações sabidamente promovidas por EAEC em modelos experimentais.
- Imprenta:
- Data da defesa: 15.03.2019
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ABNT
ANDRADE, Fernanda Batista de. Interação da serino protease SepA de Escherichia coli enteroagregativa com células epiteliais in vitro. 2019. Tese (Doutorado) – Universidade de São Paulo, São Paulo, 2019. Disponível em: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42132/tde-08122021-163454/. Acesso em: 11 jun. 2024. -
APA
Andrade, F. B. de. (2019). Interação da serino protease SepA de Escherichia coli enteroagregativa com células epiteliais in vitro (Tese (Doutorado). Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42132/tde-08122021-163454/ -
NLM
Andrade FB de. Interação da serino protease SepA de Escherichia coli enteroagregativa com células epiteliais in vitro [Internet]. 2019 ;[citado 2024 jun. 11 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42132/tde-08122021-163454/ -
Vancouver
Andrade FB de. Interação da serino protease SepA de Escherichia coli enteroagregativa com células epiteliais in vitro [Internet]. 2019 ;[citado 2024 jun. 11 ] Available from: https://www.teses.usp.br/teses/disponiveis/42/42132/tde-08122021-163454/
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