Influência dos diferentes protocolos para o desenvolvimento de biofilmes de cepas de enterococcus faecalis: análise em MCVL e espectrofotômetro (2018)
- Authors:
- USP affiliated authors: MAGALHÃES, ANA CAROLINA - FOB ; PINTO, LIDIANE DE CASTRO - HRAC ; ANDRADE, FLAVIANA BOMBARDA DE - FOB ; ESPEDILLA, EVELYN GIULIANA VELÁSQUEZ - HRAC ; CUELLAR, MARICEL ROSARIO CARDENAS - FOB
- Unidades: FOB; HRAC
- Subjects: PROTOCOLOS CLÍNICOS; BIOFILMES; ENTEROCOCCUS
- Language: Português
- Abstract: OBJETIVO: O objetivo desse estudo foi avaliar os diferentes protocolos para o crescimento de cepas de Enterococcus faecalis ATCC 29212, 4083 e um isolado clínico (25.1), analisados em Microscopia Confocal de Varredura a Laser (MCVL) e espectrofotômetro. MÉTODOS: Para a primeira análise foram obtidos cento e vinte blocos de dentina de dentes humanos do terço cervical e médio com uma broca de trefina para osso para suporte dos biofilmes, os blocos foram mantidos em soro fisiológico, esterilizados e divididos em cinco protocolos (n=7): Grupo A) meio de cultura BHI-brain heart infusion, grupo B) BHI com saliva filtrada, grupo C) BHI com glicose, grupo D saliva de McBain (biofilme microcosmo) e grupo E) BHI em placas com colágeno e grupo controle. Os blocos foram dispensados em placas de 24 poços para a formação de biofilme, com inóculo e trocas diárias de meios de cultura, incubadas em estufa a 37°C por sete dias. As placas de cultura celular de 24 poços contendo os discos de dentina com os biofilmes foram imersos em soro fisiológico para remoção de células não aderidas e depois foram corados com Life & Dead, este Kit contém o corante verde SYTO®9 e o corante vermelho iodeto de propídio corando assim, as bactérias vivas e mortas respectivamente. As imagens foram analisadas no MCVL Leica, através do software LAS AF Lite foram observados quatro campos por amostra, biovolume e viabilidade foi analisada pelo software BioImage_L v2-1. Para a leitura em espectrofotômetro o biofilme foi formado diretamente nas placas de 24 poços com trocas diárias dos meios e os mesmos grupos experimentais, os biofilmes foram lavados com PBS por 3 vezes para remoção das células não aderidas, cada poço foi corado com cristal violeta 1% por um tempo de 20 minutos, novamente cada poço foi lavado com PBS por 3vezes para remover o excesso do corante e lavados com álcool-acetona para a leitura no espectrofotômetro em 595 nm. RESULTADOS: O substrato saliva de McBain obteve melhor resultado em viabilidade com as cepas ATCC 29212 e ATCC4083, os substratos BHI com Glicose e BHI com saliva foram iguais e mais efetivos no biovolume em todas as cepas comparados com placas de colágeno (P<0.05). No espectrofotômetro as cepas ATCC4083 e 25.1 demonstraram maior biofilme especialmente com os substratos BHI glicose e BHI saliva em relação ao grupo McBain (P<0.05). CONCLUSÕES: Todas as cepas de Enterococcus faecalis formaram biofilme. O tipo de substrato foi determinante nos resultados quanto à viabilidade, biovolume e densidade.
- Imprenta:
- Publisher: Universidade de São Paulo, Hospital de Reabilitação de Anomalias Craniofaciais
- Publisher place: Bauru
- Date published: 2018
- Source:
- Conference titles: Encontro da Cultura e Extensão do HRAC-USP
-
ABNT
VELASQUEZ ESPEDILLA, Evelyn Giuliana et al. Influência dos diferentes protocolos para o desenvolvimento de biofilmes de cepas de enterococcus faecalis: análise em MCVL e espectrofotômetro. 2018, Anais.. Bauru: Universidade de São Paulo, Hospital de Reabilitação de Anomalias Craniofaciais, 2018. Disponível em: https://repositorio.usp.br/directbitstream/2d5a86c3-d8ce-46ef-9019-e0407670df42/3136195.pdf. Acesso em: 03 jun. 2024. -
APA
Velasquez Espedilla, E. G., Cuellar, M. R. C., Magalhães, A. C., Pinto, L. de C., & Andrade, F. B. de. (2018). Influência dos diferentes protocolos para o desenvolvimento de biofilmes de cepas de enterococcus faecalis: análise em MCVL e espectrofotômetro. In Anais. Bauru: Universidade de São Paulo, Hospital de Reabilitação de Anomalias Craniofaciais. Recuperado de https://repositorio.usp.br/directbitstream/2d5a86c3-d8ce-46ef-9019-e0407670df42/3136195.pdf -
NLM
Velasquez Espedilla EG, Cuellar MRC, Magalhães AC, Pinto L de C, Andrade FB de. Influência dos diferentes protocolos para o desenvolvimento de biofilmes de cepas de enterococcus faecalis: análise em MCVL e espectrofotômetro [Internet]. Anais. 2018 ;[citado 2024 jun. 03 ] Available from: https://repositorio.usp.br/directbitstream/2d5a86c3-d8ce-46ef-9019-e0407670df42/3136195.pdf -
Vancouver
Velasquez Espedilla EG, Cuellar MRC, Magalhães AC, Pinto L de C, Andrade FB de. Influência dos diferentes protocolos para o desenvolvimento de biofilmes de cepas de enterococcus faecalis: análise em MCVL e espectrofotômetro [Internet]. Anais. 2018 ;[citado 2024 jun. 03 ] Available from: https://repositorio.usp.br/directbitstream/2d5a86c3-d8ce-46ef-9019-e0407670df42/3136195.pdf - Impact of irrigation protocols with some chelators and mechanical agitation on intratubular decontamination
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| Tipo | Nome | Link | |
|---|---|---|---|
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